蜂毒肽对IL-1β诱导的大鼠腰椎终板软骨细胞Ⅱ型胶原表达的影响研究

摘要：

目的 观察蜂毒肽(Melittin)对IL-1β诱导的大鼠终板软骨细胞(endplate chondrocytes,EPCs)Ⅱ型胶原表达的影响.方法 取4周龄SD大鼠进行腰椎EPCs培养,并行形态学观察、甲苯胺蓝染色及Ⅱ型胶原免疫荧光染色鉴定.取第3代EPCs,采用MTT法确定IL-1β及Melittin对细胞干预的最适浓度.然后将第3代EPCs随机分为4组:A组为正常组,不加任何药物;B组加入最适浓度的IL-1β;C组加入最适浓度的Melittin;D组加入最适浓度的IL-1β及Melittin;干预48 h后采用Western blot法检测Ⅱ型胶原表达.结果 倒置显微镜观察示,第1代细胞多呈多角形,第5代后细胞增殖能力逐渐减弱,细胞形态向梭形转变.细胞质中的酸性黏液物质(如蛋白多糖)被甲苯胺蓝染成深蓝色.免疫荧光染色标记Ⅱ型胶原后,可见细胞骨架部分呈阳性表达(呈绿色荧光).MTT法检测示,在干预24、48 h后,IL-1β及Melittin对EPCs均有抑制作用,并呈剂量依赖性,最终确定IL-1β及Melittin干预的最适浓度分别为10 ng/mL和1.0 μg/mL.Western blot法检测示,与A组比较,B组IL-1β干预后Ⅱ型胶原表达明显减少,C组Melittin干预后Ⅱ型胶原表达明显增加,但D组与A组比较无明显差异.A、B、C、D组Ⅱ型胶原相对表达量分别为0.991±0.024、0.474±0.127、1.913±0.350、1.159±0.297,除A、D组间比较差异无统计学意义(P＞0.05)外,其余组间比较差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 研究表明Melittin 具有保护终板软骨作用,为其用于防治脊柱退变性疾病提供了相关实验依据.

关键词：蜂毒肽、终板软骨细胞、IL-1β、Ⅱ型胶原、大鼠

所属期刊栏目：31

分类号：R68;R6

在线出版日期：2017-04-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：345-350