周期性力学刺激对成肌细胞自身抗原表达的影响
目的 探讨周期性力学刺激对体外培养的成肌细胞自身抗原表达的影响. 方法 取C2C12细胞根据处理方法不同分为实验组及对照组,其中实验组分为4个亚组,即2、4、6d周期性拉伸组(2、4、6d拉伸组)及1d拉伸组.2、4、6d拉伸组:细胞置于Flexercell 5000柔性基底加载系统,以0.25 Hz拉伸频率、10％拉伸幅度进行每天2h应力加载,连续加载2、4、6d; 1d拉伸组:细胞置于Flexercell 5000柔性基底加载系统,以1 Hz拉伸频率、15％拉伸幅度拉伸1h,23 h后收集细胞;对照组:细胞常规培养1、2、4、6d.培养期间于倒置相差显微镜下观察细胞生长情况.采用流式细胞仪检测细胞增殖情况,Western blot检测自身抗原DNA依赖蛋白激酶催化亚基(Ku/the catalytic subunit of DNA-dependent protein kinase,DNA-PKcs)、Mi-2 (reconfigurable components deacetylase complexes of NuRD)、U1-70 (A partofATP-dependent DNA helicase Ⅱ)、组氨酰-tRNA合成酶(histidyl tRNA synthetase,HRS)表达情况. 结果 经培养后,1d拉伸组可见脱落细胞,对照组1d时无细胞脱落；2d拉伸组细胞增殖较对照组2d时明显；4 d拉伸组细胞出现分化,6d拉伸组细胞部分融合,与对照组4、6d时情况一致.1d拉伸组细胞经单次拉伸后出现凋亡,相对DNA增殖指数(relativeDNA proliferation index,DPI)与对照组1d时比较,差异无统计学意义(t=0.346,P=0.747).经周期性拉伸后,2、4d拉伸组DPI较对照组2、4d时显著提高(P＜0.05),6d拉伸组与对照组6d时比较差异无统计学意义(t=1.191,P=0.303).2d拉伸组DNA-PKcs、Mi-2、HRS和U1-70蛋白相对表达量均较对照组2d时明显降低(P＜ 0.05); 4d拉伸组与对照组4d时比较差异均无统计学意义(P＞0.05).4d拉伸组各抗原蛋白相对表达量均较2d拉伸组显著增加(P＜0.05),而对照组4d时均较2d时显著降低(P＜0.05). 结论 短期力学刺激可以抑制成肌细胞自身抗原表达,但随时间延长,细胞分化融合以及对力学刺激的适应使其对自身抗原表达抑制作用减弱.
力学刺激、成肌细胞、自身抗原、特发性炎性肌病
27
国家自然科学基金面上资助项目81171724;National Natural Science Foundation of China81171724
2013-10-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共6页
1128-1133
