转化生长因子β1不同作用时间对体外培养小鼠失神经骨骼肌肌源性干细胞内结缔组织生长因子的影响
目的 观察转化生长因子β1(transforming growth factor β1,TGF-β1)对失神经骨骼肌肌源性干细胞(muscle derived stem cell, MDSC)内结缔组织生长因子(connective tissue growth factor, CTGF)的影响,探讨TGF-β1-CTGF通路致失神经骨骼肌纤维化的作用及机制.方法 采用差速贴壁法分离培养并鉴定小鼠失神经骨骼肌MDSC,用浓度为10 ng/ml的TGF-β1培养24 h前、后分别作表型鉴定.体外MDSC分别在TGF-β1浓度为10 ng/ml的培养基内培养0、3、6、12、24和48 h,按时间点分为A～F组,Western blot检测CTGF蛋白表达,实时荧光定量 RT-PCR检测CTGF mRNA水平.结果 免疫组织化学观察示,加入TGF-β1干预前MDSC高度表达Sca-1,阳性率96%;TGF-β1干预后Sca-1表达阳性率明显降低,阴性率＞99%.Western blot检测A～F组CTGF与β-actin的平均吸光度(A)值比值分别为0.788±0.123、1.063±0.143、2.154±0.153、2.997±0.136、3.796±0.153和3.802±0.175,A～D组间两两比较差异均有统计学意义(P＜0.05), D～F组间两两比较差异无统计学意义(P＞0.05).A～F组RT-PCR 的ΔCt值分别为1.659±0.215、1.897±0.134、2.188±0.259、2.814±0.263、2.903±0.126和3.101±0.186,A～D组组间比较差异有统计学意义(P＜0.05),E组和F组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 TGF-β1能促进体外培养小鼠MDSC生成CTGF,在3～12 h时间范围内呈时间依赖关系.
转化生长因子β1、肌源性干细胞、结缔组织生长因子、时间依赖性
21
AR813.11;R651.3
中国博士后科学基金2004035634
2007-07-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共4页
557-560
