胚胎干细胞移植修复脊髓损伤的实验研究
目的 观察胚胎干细胞(embryonic stem cell,ES)诱导的神经前体细胞移植,对小鼠脊髓损伤神经功能恢复的影响.方法 取由上海市发育生物学重点实验室提供的ES进行细胞培养和体外诱导,收集ES衍生细胞.并进行RT-PCR检测.将50只C57/BL6J小鼠制备为T9、10脊髓半横断模型,将存活的28只小鼠随机分为三组.假手术组(A组):9只,未作任何处理;手术/细胞组(B组):10只,于距损伤区域以远约1 cm的椎管内注射2～3 μl制备的ES衍生细胞,总细胞数为9×105个;手术/DMEM组(C组):9只,按B组方法注射2～3 μl DMEM.术后1、2、4、6和8周采用BBB后肢功能评分观察小鼠神经功能恢复情况,取损伤脊髓进行X-gal染色和免疫组织化学染色观察.结果 ES经体外诱导培养,呈圆形或椭圆形小集落生长,有1个或多个核仁.RT-PCR检测,ES细胞诱导后表达巢蛋白及微管相关蛋白,但未表达胶质纤维酸性蛋白.小鼠实验,BBB后肢功能评分显示术后各时间点A组与B、C组比较,差异均有统计学意义(P＜0.01).B组与C组比较,1、2和4周时,差异有统计学意义(P＜0.01);6、8周时,组间差异无统计学意义(P＞0.05).X-gal染色观察,B组呈阳性染色,A、C组均为阴性.免疫组织化学染色观察,B组在损伤脊髓部位,表达兔抗神经微丝蛋白,未表达胶质纤维酸性蛋白.结论 将ES培养诱导分化为神经前体细胞移植后,能够存活、迁移,并分化为神经元,但未明显改善神经功能.
脊髓损伤、胚胎干细胞、移植、小鼠
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R651.2;Q813(外科学各论)
黑龙江省教育基金11511402
2007-06-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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