去分化关节软骨细胞生物反应器培养反分化的实验研究
目的 观察体外经传代培养去分化的成人关节软骨细胞,在生物反应器培养后生物学性状的变化,探索去分化软骨细胞反分化的手段,为软骨细胞移植修复关节软骨缺损建立合适的体外培养方法.方法 无菌条件下取成人关节软骨组织,Ⅱ型胶原酶消化法(0.2%,37 ℃,3 h)分离软骨细胞,分成两组:一组常规单层传代培养,另一组添加重组人的生长因子(1 ng/ml转化生长因子β1+5 ng/ml成纤维细胞生长因子2)体外培养传代大量扩增后,无微载体生物反应器内培养3周.血小板计数器行细胞计数,计算各代细胞倍增时间;细胞爬片和石蜡 冻切片进行HE、蕃红O、阿利新蓝染色,Ⅰ、Ⅱ型胶原和aggrecan免疫组织化学检测,观察细胞表型变化.结果 成人关节软骨细胞体外培养3代后迅速去分化,增殖缓慢.添加生长因子培养细胞去分化速度减缓;传10代,细胞扩增2 000倍以上,部分去分化,但细胞扩增增殖能力仍很强;传20代软骨细胞表型基本丢失,但仍有增殖能力;置于生物反应器继续培养3周,细胞番红O染色强阳性、aggrecan和Ⅱ型胶原阳性,Ⅰ型胶原阴性,表型恢复良好.结论 软骨细胞在体外大量扩增后,在生物反应器培养,可恢复其表型,可望用于在体外培养时去分化软骨细胞的再分化.
关节软骨细胞、生物反应器、细胞培养
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R681.3;Q813.1(骨科学（运动系疾病、矫形外科学）)
高比容电子铝箔的研究开发与应用项目2002AA205021
2006-09-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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