人骨形成蛋白2腺病毒表达载体转染体外培养兔腰椎间盘细胞的研究

摘要：

目的 研究人骨形成蛋白2腺病毒表达载体(adenovirus-mediated human bone morphogenetic protein 2 gene,Ad-hBMP-2)转染体外培养兔腰椎间盘细胞,分析其对腰椎间盘细胞的影响.方法 成年健康新西兰大白兔4只,体重4～5kg,取L2、L3到L6、L7节段椎间盘细胞体外培养.利用免疫荧光和蛋白印迹法(Western blot)检测空白对照组(未转染)、Ad-LacZ组[感染复数(multiplicity of infection,MOI)150MOI]和不同剂量Ad-hBMP-2(50、100、150 MOI)组转染后细胞hBMP-2的表达水平.采用RT-PCR检测转染后细胞Ⅱ型胶原和aggrecan mRNA表达水平.结果 转染Ad-hBMP-2后通过免疫荧光和蛋白印迹法可见随转染剂量增加hBMP-2表达量逐渐增加,与50 MOI组比较100 MOI组升高102%,150 MOI组升高183%.在转染后第6天RT-PCR结果显示转染组aggrecan和Ⅱ型胶原mRNA的表达高于对照组,并且随转染剂量增高mRNA的表达量均逐渐增加.aggrecan mRNA从50 MOI组的61.7%增加到150 MOI组的167.3%.Ⅱ型胶原mRNA从50 MOI组的77.3%增加到150 MOI组的169.0%.结论 AdhBMP-2可高效转染体外培养兔腰椎间盘细胞,随转染剂量增加hBMP-2表达量逐渐增加,同时上调aggrecan和Ⅱ型胶原mRNA的表达,并存在剂量依赖关系.

关键词：腺病毒、骨形成蛋白2、椎间盘细胞、基因转染

所属期刊栏目：20

分类号：Q813.1;R681.5(生物工程学(生物技术))

在线出版日期：2006-09-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：820-824