两步冷冻法对周围神经雪旺细胞生物活性的影响
目的 探讨两步冷冻法不同冷冻温度对周围神经雪旺细胞(Schwann cell,SC)生物活性的影响.方法 雌性SD大鼠80只,切取双侧坐骨神经2 cm,随机分为8组,每组10只20条坐骨神经.1组为新鲜对照组,不作任何处理;另7组为实验组,采用两步冷冻法分别降温至-20、-30、-40、-50、-60、-70和-80℃,保存2 h后转入液氮中(-196℃)保存48 h,取出后在37℃水浴箱中快速复温1 min,消化收集各组SC,经Calceim-AM荧光染色,作流式细胞仪分析,求出各组细胞平均荧光强度,再经共聚焦显微镜直接观察SC荧光强度,进一步判断SC的生物活性.结果 经流式细胞仪检测各组SC荧光强度为新鲜对照组242.522 0±9.568 4,-20℃组168.677 0±10.207 0,-30 ℃组214.992 0±8.329 1,-40℃组235.526 0±9.280 5,-50℃组222.434 0±8.515 5,-60℃组217.409 0±9.515 7,-70℃组132.376 0±13.459 7,-80 ℃组108.132 0±16.033 1;-40℃组荧光强度较其它实验组强,差异有统计学意义(P<0.01).共聚焦显微镜观察各组SC生物活性,并作荧光强度分析:新鲜对照组143.700 0±5.567 8,-20℃组119.700 0±5.165 1,-30℃组121.300 0±4.347 4,-40 ℃组139.700 0±5.012 2,-50℃组121.000 0±4.546 1,-60 ℃组118.400 0±4.926 1,-70℃组81.200 0±5.116 4,-80℃组79.000 0±5.716 4;新鲜对照组SC生物活性.较各实验组强,-40℃组SC生物活性较其它实验组强,差异均有统计学意义(P<0.01).结论 两步冷冻法均能较好保存SC生物活性,以-40 ℃组SC生物活性最好.
冷冻保存、雪旺细胞、生物活性
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R322.85;R338(人体形态学)
安徽省卫生厅资助项目98-162-02
2006-09-11(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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