基于谱效关系探讨肉苁蓉水提物抗糖尿病肾病的有效成分及其作用机制

摘要：

目的 基于肉苁蓉水提物不同洗脱部位质谱峰面积与其抗糖尿病肾病作用的谱效关系,筛选出肉苁蓉水提物抗糖尿病肾病的药效物质,探寻其治疗糖尿病肾病的药效物质基础及其作用机制.方法 应用UPLC-Orbitrap-MS/MS技术定性色谱峰;MTT法检测肉苁蓉水提物不同洗脱部位对高糖高脂HK-2细胞增殖的影响;灰色关联分析和偏最小二乘法分析质谱峰面积与抗糖尿病肾病活性的谱效关系.MTT法测定肉苁蓉水提物单体成分的抗糖尿病肾病活性;生化试剂盒检测过氧化指标SOD和GSH-Px水平;ELISA法检测炎症因子IL-1β、TNF-α和TGF-β水平;Western blotting检测凋亡相关蛋白的表达.结果 UPLC-Orbitrap-MS/MS技术推测鉴定了 72个共有化合物;在肉苁蓉水提物中,水、20％乙醇、40％乙醇洗脱部位会不同程度增加高糖高脂环境中的HK-2细胞增殖率;偏最小二乘法和灰色关联分析显示肉苁蓉水提物抗糖尿病肾病贡献较大的成分是8-表去氧马钱子酸、京尼平苷酸、松脂素、甜菜碱、丁香苷等;MTT实验发现8-表去氧马钱子酸、京尼平苷酸对高糖高脂环境中的HK-2细胞具有显著增殖作用;生化试剂盒和ELISA检测结果表明8-表去氧马钱子酸和京尼平苷酸能够上调SOD和GSH-Px活力,同时对炎症因子IL-1β、TNF-α和TGF-β表达水平具有抑制作用;Western blotting结果显示8-表去氧马钱子酸和京尼平苷酸能够下调皮间质转化标志物α-SMA、Collagen I,上调E-cadherin,并且可以通过抑制PI3K-Akt通路发挥抗糖尿病肾病作用.结论 在肉苁蓉所含众多化学成分中通过抗糖尿病肾病的谱效关系筛选的8-表去氧马钱子酸和京尼平苷酸这2种化合物可以通过抑制PI3K-Akt信号通路来影响氧化应激、炎症反应和肾小管细胞上皮间质转化进程,起到改善肾脏病理、纤维化程度及肾脏功能的作用,为肉苁蓉水提物治疗糖尿病肾病后续的深入研究提供参考.

关键词：肉苁蓉、水提物、UPLC-Orbitrap-MS/MS、谱效关系、糖尿病肾病

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分类号：R284.1;R917.101(中药学)

资助基金：国家自然科学基金;新疆维吾尔自治区自然科学基金重点项目;新疆天然药物有效成分与药物释放技术重点实验室;新疆维吾尔自治区自然科学基金面上项目

在线出版日期：2024-07-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共11页

页码：1313-1323