青天葵甲醇提取物通过ERK通路抑制人肝癌细胞增殖并诱导其凋亡

摘要：

目的 研究青天葵甲醇提取物(Nerviliafordii methanol extracts,NFME)体外对人肝癌SMMC7721和HepG2细胞的凋亡作用及其作用机制.方法 紫外-可见分光光度法测定青天葵中总黄酮和总多酚的含量;MTT法检测不同浓度(0,0.25,0.5,1,1.5,2 mg·mL-1)NFME处理24 h对SMMC7721、HepG2和LO2细胞生长抑制率的影响;克隆形成试验观察NFME对SMMC7721和HepG2细胞克隆形成率的影响;Hoechst凋亡染色观察NFME对SMMC7721细胞凋亡的影响;流式细胞术检测NFME对SMMC7721细胞凋亡和细胞周期的影响;Western blotting测试NFME作用下caspase3、PARP、ERK1/2和c-Raf蛋白磷酸化水平的变化.结果 NFME中总多酚含量为(4.25±0.46)mg·g-1,总黄酮含量为(4.72±0.13)mg· g-1;MTT试验结果显示,与对照组相比,在给药24 h时0.5 mg·mL-1的NFME就能抑制SMMC7721和HepG2细胞的增殖(P＜0.001);克隆形成试验表明,0.125 mg·mL-1的NFME能够抑制SMMC7721和HepG2细胞集落的形成(P＜0.001);Hoechst凋亡染色观察到0.25 mg·mL-1的NFME作用24 h能够观察到SMMC7721细胞发生凋亡(P＜0.05);流式细胞试验结果证实0.5 mg·mL-1的NFME能够诱导SMMC7721细胞的凋亡(P＜0.01),凋亡率14.43％,阻滞细胞周期于S期;Western blotting结果表明NFME能使SMMC7721细胞中caspase3发生剪切,随着给药浓度增加其剪切作用越明显(P＜0.05),活化的caspase3剪切下游PARP的表达;同时NFME能够降低SMMC7721细胞中ERK1/2和c-Raf蛋白的磷酸化水平(P＜0.05).结论 NFME能抑制人肝癌SMMC7721和HepG2细胞的活性并诱导其发生凋亡,其作用机制可能与抑制ERK信号通路从而诱导细胞凋亡有关.

关键词：青天葵甲醇提取物;肝癌;SMMC7721;HepG2;凋亡

所属期刊栏目：38

分类号：R285.5(中药学)

资助基金：国家自然科学基金项目;广西自然科学基金资助项目

在线出版日期：2021-09-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1409-1415