AGGF1通过激活Wnt/β-catenin信号通路促进结直肠癌发生发展

摘要：

目的 研究 G 补缀 FHA 域血管新生因子 1(angiogenic factor with G-patch and FHA domain 1,AGGF1)调控Wnt/β-catenin信号通路对结直肠癌细胞(colorectal cancer,CRC)增殖、侵袭和上皮间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)的可能机制.方法 通过裸鼠荷瘤免疫组化法检测AGGF1在正常组织和癌组织中的表达.qRT-PCR和Western blotting 检测 NCM460、SW620、HT29、HCT116、SW480中 AGGF1 的 mRNA 和蛋白表达水平.于 HCT116细胞中过表达AGGF1,分为Vector组和AGGF1组;于SW620细胞中敲减AGGF1,分为shControl组和shAGGF1组.CCK-8法和克隆形成试验测定细胞活性和细胞克隆数目.划痕试验和Transwell试验检测细胞迁移和侵袭情况.免疫荧光检测细胞 E-cadherin、N-cadherin 的表达.Western blotting 检测细胞 E-cadherin、N-cadherin、AGGF1、β-catenin、糖原合酶激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)、p-GSK-3β蛋白表达水平.结果 AGGF1蛋白表达在CRC组织中明显增高.AGGF1 mRNA和蛋白表达水平在HCT116细胞中最低,在SW620细胞中最高.CCK-8法、克隆形成试验、划痕试验和Transwell试验结果显示,在HCT116细胞中,与Vector组比较,AGGF1组48,72,96 h细胞活性、克隆细胞数目、相对迁移距离、侵袭细胞数显著增加(P＜0.05或P＜0.01);而在SW620细胞中,与shControl组比较,shAGGF1组结果相反(P＜0.05或P＜0.01).免疫荧光和Western blotting检测结果显示,与Vector组比较,AGGF1组E-cadherin荧光表达和蛋白表达水平降低(P＜0.01),N-cadherin 增强(P＜0.05或 P＜0.01),同时上调 AGGF1、β-catenin、p-GSK-3β/GSK-3β 蛋白表达(P＜0.01);与shControl组比较,shAGGF1组E-cadherin荧光表达和蛋白表达水平显著升高(P＜0.01),N-cadherin显著降低(P＜0.05或 P＜0.01),同时下调 AGGF1、β-catenin、p-GSK-3β/GSK-3β 蛋白表达(P＜0.05或 P＜0.01).结论 AGGF1 可通过激活Wnt/β-catenin信号通路异常表达,上调β-catenin、p-GSK-3β、N-cadherin表达,下调E-cadherin表达,促进CRC细胞增殖、迁移、侵袭和EMT,从而促进CRC发生发展.

关键词：AGGF1、Wnt/β-catenin信号通路、结直肠癌、细胞增殖、侵袭、上皮间质转化

所属期刊栏目：38

分类号：R965(药理学)

在线出版日期：2021-08-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1319-1326