MicroRNA-486和TGF-β1对人主动脉瓣膜钙化的影响及其机制研究

摘要：

目的 研究microRNA-486(miRNA-486)对人主动脉瓣膜间质细胞(VICs)钙化的影响及作用机制.方法 体外培养VICs,经成骨诱导后用双荧光素报告基因检测miRNA-486靶基因.转染miR-486 mimic、miR-486 Inhibitors后,将细胞分为miR-486 mimic组、miR-486 mimic NC组、miR-486 Inhibitors组、miR-486 Inhibitors NC组.采用茜红素染色、ALP试验分析各组钙化程度,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)、免疫荧光试验检测miR-486靶基因及成骨相关因子mRNA和蛋白的表达水平.结果 双荧光素报告基因检测和Western blot检测结果显示,转录生长因子-β1(TGF-β1)为潜在靶基因.茜红素染色、ALP试验结果显示,miR-486 mimic组钙化程度高于miR-486 Inhibitors组.qRT-PCR、免疫荧光试验结果表明,miR-486 mimic组TGF-β1、SMAD3 mRNA和蛋白表达水平较低(P<0.05);miR-486 mimic组RUNX2、骨钙素mRNA表达水平较miR-486 Inhibitors组高(P<0.05).结论 miR-486可通过下调TGF-β1的表达,促进RUNX2、骨钙素的表达和活性,诱导间质细胞向成骨细胞分化.

关键词：心脏瓣膜疾病、microRNA-486、转录生长因子-β1、茜红素染色、碱性磷酸酶活性、主动脉瓣膜

所属期刊栏目：28

分类号：R542.5(心脏、血管（循环系）疾病)

资助基金：国家自然科学基金:81560077;上海健康医学院种子基金:HMSF-16-22-030;上海市浦东新区卫计委优秀青年医学人才培养计划:PWRq2015-24

在线出版日期：2018-11-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：25-32