同型半胱氨酸对FABP4启动子活性的影响

摘要：

目的 通过克隆脂肪酸结合蛋白4(FABP4)基因启动子,确定其活性核心区和功能片段,分析心血管疾病独立危险因子同型半胱氨酸(Hcy)对FABP4启动子活性的影响.方法 应用生物信息学预测FABP4基因启动子区顺式转录作用元件和反式作用因子,以pGL3-Basic为载体,采用基因重组法构建启动子截取片段,转染HEK-293A细胞,观察不同截取片段的荧光素酶活性变化,确定活性最强的片段.进一步将核心启动子片段(-2000/-1)转染巨噬细胞,观察不同浓度Hcy和DNA甲基化抑制剂5-氮杂胞苷(AZC)对FABP4基因启动子活性的影响.结果 不同长度截取片段转染HEK-293A细胞后检测荧光素酶活性结果显示,与pGL3对照组比较,-2000/-1片段转录活性最强.将核心启动子片段(-2000/-1)转染巨噬细胞并用不同浓度Hcy干预后,与0μmol/L Hcy组比较,100和200μmol/L Hcy组启动活性升高;与100μmol/L Hcy组比较,在100μmol/L Hcy基础上用AZC干预后,FABP4基因启动活性升高(P<0.05).结论 成功克隆FABP4启动子的4个片段,且确定FABP4基因核心启动子位于-2000/-1片段;Hcy可以促进FABP4基因核心启动子片段活性,补充AZC后可以进一步促进Hcy引起的FABP4启动子活性升高.

关键词：FABP4、启动子活性、同型半胱氨酸

所属期刊栏目：28

分类号：R36(病理学)

资助基金：国家自然科学基金81560084;宁夏自然科学基金NZ16063;宁夏高等学校科学研究项目NGY2016087

在线出版日期：2018-10-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：25-30