IGHG1基因对膀胱癌细胞增殖凋亡及迁移的影响

摘要：

目的 探讨沉默IGHG 1基因对膀胱癌EJ细胞增殖、凋亡及迁移的影响.方法 将靶向沉默IGHG 1基因的慢病毒载体(LV-IGHG1-RNAi)感染EJ细胞,构建稳定沉默IGHG 1基因的EJ细胞(shIGHG1-EJ细胞)作为实验组;将阴性对照序列(NC)慢病毒载体感染EJ细胞,构建稳定转染NC序列的NC-EJ细胞作为阴性对照组;未转染膀胱癌EJ细胞作为空白对照组.用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测细胞IGHG1 mRNA的相对表达量,Western blot检测细胞IgG、Caspase-3和Caspase-3剪切片段蛋白的表达,CCK-8法检测细胞的增殖,流式细胞术(FCM)检测细胞的凋亡,细胞划痕实验检测细胞的迁移.结果 shIGHG1-EJ细胞转染率为(76.667±0.042)%,NC-EJ细胞转染率为(75.333±0.055)%.qRT-PCR、Western blot检测结果显示,与空白对照组相比,shIGHG1-EJ细胞IGHG1 mRNA和IgG γ蛋白表达量降低(P<0.05),shIGHG1-EJ细胞IGHG 1基因被沉默.CCK-8法结果显示,与空白对照组相比, shIGHG1-EJ细胞增殖降低(P <0.05);FCM和Western blot检测结果显示,与空白对照组相比,shIGHG1-EJ细胞凋亡率增加(P <0.05),且在17 kD处出现Caspase-3剪切片段;细胞划痕实验结果显示,shIGHG1-EJ细胞迁移能力仅为EJ细胞的36%(P <0.05);同时NC-EJ细胞在增殖、凋亡及迁移方面与EJ细胞比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 EJ细胞经慢病毒载体沉默IGHG 1基因后,细胞增殖和迁移水平降低,细胞凋亡率增加.

关键词：膀胱肿瘤、基因沉默、IGHG1、增殖、细胞凋亡

所属期刊栏目：28

分类号：R737.14(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金81360375;海南省社会发展重大专项课题2015SF31

在线出版日期：2018-05-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：15-21