siRNA沉默YKL-40对支气管哮喘小鼠气道平滑肌增殖及迁移的影响

摘要：

目的 探讨小干扰核糖核酸(siRNA)沉默人软骨糖蛋白39(YKL-40)对支气管哮喘小鼠气道平滑肌增殖及迁移的影响.方法 20只健康雌性BALB/c小鼠随机分为健康组(n=10)和哮喘组(n=10),采取腹腔注射抗原和雾化吸入卵蛋的方式复制哮喘模型,健康组小鼠处理与哮喘组相同,只是将致敏物换成生理盐水,留取气管和支气管进行细胞培养,两组小鼠气道壁平滑肌细胞根据转染物不同分为siRNA-YKL-40组、阴性对照组和空白对照组,MTT法检测不同转染组小鼠气道壁平滑肌细胞增殖情况,Transwell法检测不同转染组小鼠气道壁平滑肌细胞迁移能力,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹法(Westem blot)检测不同转染组小鼠气道壁平滑肌细胞中YKL-40、白细胞介素4(IL-4)和干扰素-γ(IFN-γ)基因和蛋白表达.结果 哮喘组中siRNA-YKL-40组48～96h时细胞吸光度A值均低于阴性对照组和空白对照组,哮喘组中siRNA-YKL-40组、阴性对照组和空白对照组48～96 h时细胞吸光度A值均高于健康组,差异有统计学意义(P＜0.05);哮喘组中siRNA-YKL-40组迁移细胞数(86.38±8.61)个,低于阴性对照组和空白对照组,哮喘组迁移细胞数均高于健康组,差异有统计学意义(P＜0.05);哮喘组和健康组中siRNA-YKL-40组YKL-40基因和蛋白相对表达量均低于阴性对照组和空白对照组(P＜0.05),哮喘组中siRNA-YKL-40组IL-4基因和蛋白相对表达量均低于阴性对照组和空白对照组,而IFN-γ基因和蛋白相对表达量与IFN-γ/IL-4均高于阴性对照组和空白对照组(P＜0.05),与健康组比较,哮喘组中siRNA-YKL-40组、阴性对照组和空白对照组IL-4基因和蛋白相对表达量均升高,而IFN-γ基因和蛋白相对表达量和IFN-γ/IL-4均降低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 靶向YKL-40基因沉默能抑制气道壁平滑肌细胞增殖及迁移,可能与调节IL-4/IFN-γ失衡状态而减少气道炎症反应有关.

关键词：支气管哮喘、人软骨糖蛋白39、沉默核糖核酸、细胞增殖、细胞迁移

所属期刊栏目：27

分类号：R562.25(呼吸系及胸部疾病)

资助基金：贵州省科技计划黔科合SY字,20123101

在线出版日期：2017-09-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：15-21