10.3969/j.issn.1005-8982.2016.24.002
基于环介导等温扩增技术建立的假丝酵母菌快速检测方法
目的:基于环介导等温扩增技术(LAMP)建立一种假丝酵母菌的快速检测方法。方法依据假丝酵母属18 S rDNA基因保守序列,采用Primer Explorer V4软件设计引物,建立LAMP扩增方法和反应体系,对体系的4种关键参数和3项性能指标进行优化和探讨,并用临床样本进行方法验证。结果6种常见假丝酵母菌LAMP法检测均为阳性;最适扩增条件为:温度63~65℃、Bst酶活性4 IU、Mg2+浓度4 mol/L、扩增时间1 h;7种对照菌种及人全血DNA样本LAMP扩增结果均为阴性;检测限为102~107 CFU/ml。经52例临床样本验证,该法敏感性为100%,特异性为95%。结论该研究建立的LAMP假丝酵母菌检测方法具有实用、简便、快速、特异和敏感的特点,可为临床提供一种新的假丝酵母菌诊断方法。
假丝酵母菌、环介导等温扩增、检测方法
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R-331(医学研究方法)
西南医科大学青年科技基金014QN-102
2017-01-10(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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