内皮抑素30肽对HepG2细胞黏附、侵袭能力影响的机制研究

摘要：

目的：探讨RGD修饰的人内皮抑素30肽对HepG2细胞黏附、侵袭的影响及作用机制。方法人工合成人内皮抑素1～30位氨基酸（30肽，序列25～31由RGIRGAD改为RGDRGD）所对应的核苷酸序列，连接到质粒pTYB2中，再转化至大肠埃希菌BL21（DE3）中表达，同法合成人内皮抑素1～27位氨基酸构成的27肽作为对照。细胞黏附实验及Transwell实验分别检测30肽和27肽对HepG2细胞黏附能力和侵袭能力的影响，同时筛选与侵袭作用相关的整合素；免疫荧光检测30肽和27肽对αvβ3整合素的聚集作用，流式细胞仪检测30肽和27肽对HepG2细胞表面相应整合素表达的影响；逆转录-聚合酶链反应（RT- PCR）及Western blot检测30肽和27肽对HepG2细胞TIMP1和TIMP2 mRNA和蛋白质表达量的影响。结果30肽能明显抑制HepG2细胞黏附、侵袭，对侵袭作用的影响与整合素αvβ3相关，同时，30肽能上调HepG2细胞中TIMP1和TIMP2 mRNA及蛋白质的表达，30肽加αvβ3抗体后，上述作用明显增强。结论30肽可能是通过整合素αvβ3发挥其抗肿瘤侵袭转移作用，可以成为临床上肝癌的辅助化疗药物发挥作用。

关键词：内皮抑素、RGD序列、侵袭、TIMP

所属期刊栏目：26

分类号：R735(肿瘤学)

资助基金：黑龙江省教育厅资助项目No12511619；齐齐哈尔医学院博士专项科研基金

在线出版日期：2016-04-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：11-17