一种高通量筛选调节连接蛋白43表达药物的方法

摘要：

目的 建立一种可用于高通量筛选调节连接蛋白43(Cx43)表达药物的方法.方法 PCR法扩增到Cx43启动子,构建Cx43启动子-绿色荧光蛋白(GFP)逆转录表达我体,包装病毒感染肝癌细胞株BEL7402建立稳定表达细胞系,接种于96孔板,加促Cx43表达药物全反式维甲酸(ATRA)0、5、10、20、30和40μmol/L处理细胞24、48和72 h,用多功能酶标仪分析绿色荧光强度改变,以此反映药物对Cx43表达的影响,检验该方法能否用于调节Cx43表达药物高通量筛选.结果 成功构建Cx43启动子-GFP逆转录表达载体,并获得Cx43启动子驱动GFP稳定表达的BEL7402细胞系,10μ mol/L RA组荧光强度明显高于对照组(P＜0.01).结论 该Cx43启动子-GFP逆转录表达系,配合多功能酶标仪分析,可用于影响Cx43表达中药的高通量筛选,该方法的建立为筛选调节Cx43表达的药物提供了一种有效的技术手段.

关键词：连接蛋白43、绿色荧光蛋白、药物筛选、多功能酶标仪

所属期刊栏目：23

分类号：R965.1(药理学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81072906,30973811;广东省学科建设专项基金K5100007;广东省中医药管理局资助项目20122157

在线出版日期：2016-01-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：21-25