改良盐析法提取全血基因组DNA的影响因素研究

摘要：

目的 观察红细胞裂解时间、DNA纯化方式以及DNA干燥时间对改良盐析法提取全血基因组DNA的影响.方法 改良盐析法提取全血基因组DNA时,分别采用不同的红细胞裂解时间、DNA纯化方式以及DNA干燥时间.使用流式细胞术检测红细胞裂解后的细胞总数及死细胞比例,紫外分光光度计检测DNA的浓度和纯度,琼脂糖凝胶电泳检测PCR扩增产物.结果 红细胞裂解时间从10 min延长至120 min,死细胞比例随时间延长而增加,但细胞总数、DNA产量与纯度无明显变化；采用异丙醇沉淀法纯化DNA得到的DNA产量与纯度均显著高于使用DNA分离柱纯化的DNA; DNA干燥时间从120 min缩短至30 min,既不影响DNA的产量与纯度,也不影响后续PCR扩增实验.结论 改良盐析法提取全血基因组DNA时,红细胞裂解时间可延长至120 min,DNA干燥时间可缩短至30 min,异丙醇沉淀法优于DNA分离柱纯化的DNA.

关键词：全血基因组DNA提取、改良盐析法、红细胞裂解时间、DNA纯化方式、DNA干燥时间

所属期刊栏目：22

分类号：Q789(基因工程（遗传工程）)

资助基金：成都医学院自然基金CYZ08-015,06Z2006-001

在线出版日期：2016-01-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：42-46