靶向EGFR基因RNA干扰对胃癌细胞BGC823细胞增殖和凋亡的影响
目的 利用RNA干扰技术下调表皮生长因子受体(EGFR)基因的表达,观察其对胃癌BGC823细胞增殖和凋亡的影响.方法 将细胞分为3组,空白对照组、空载体组和实验组(转染EGFRshRNA组).构建针对EGFR基因的s和RNA真核表达载体,转染入胃癌BGC823细胞中,运用RT-PCR和Western blot检测EGFR在rnRNA和蛋白水平的变化；WST-1法检测细胞增殖的影响:Hoechst33258染色观察细胞核形态学变化.实验重复3次.结果 成功构建表达质粒pGenSil-EGFR并转染BGC823细胞,shRNA下调EGFR的表达后,与空白对照组相比EGFR在mRNA和蛋白水平的表达均下降,抑制率分别为58.6％和75.2％.shRNA转染24、48、72 h,WST-1法检测胃癌细胞BGC823的增殖情况,与空白对照组相比,24 h后三组差异不明显(F =0.326,P＞0.05),48 h及72 h后,细胞增殖明显下降(F=68.25及274.45,P＜0.001),有统计学意义.EGFRshRNA作用BGC823细胞72 h后,经Hoechst33258染色发现,实验组细胞核染色质边集,出现凋亡小体.结论 靶向EGFR基因RNA干扰能够阻抑胃癌细胞BGC823细胞的EGFR表达,诱导细胞凋亡,抑制细胞增殖,EGFR基因有望成为胃癌基因治疗靶点.
RNA干扰、表皮生长因子受体、BGC823细胞、增殖与凋亡
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R-33(医学研究方法)
2016-01-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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