靶向Notch1基因的siRNA对裸鼠人肝细胞癌移植瘤细胞增殖和凋亡的影响

摘要：

目的 探讨Notch1基因在人肝细胞癌HepG2细胞裸鼠移植瘤中的作用.方法 于裸鼠腋下接种0.2×108/mL的HepG2细胞悬液,建立人肝细胞癌裸鼠移植瘤模型,将其分为3组:未处理组(接种PBS悬浮的未转染细胞)、空载体转染组(接种空载体转染的细胞)和Notch1转染组(接种靶向Notch1基因的siRNA转染的细胞).连续2周观察转染荷瘤裸鼠的生长情况,采用TdT介导的dUTP缺口末端标记技术(TUNEL)研究肿瘤组织中的细胞凋亡,利用RT-PCR和蛋白质印迹技术检测肿瘤组织中Notch1、bcl-2和bax mRNA和蛋白的表达.结果 Notch1 siRNA转染组中肿瘤的生长明显受到抑制,其肿瘤的重量为(0.685±0.138)g,显著低于未处理组( 2.896±0.513)g和空载体转染组(2.776±0.623 )g(F =29.672,均P＜0.01).TUNEL结果表明,Notch1 siRNA转染组每500个细胞中凋亡的细胞数为(91±3),明显高于未处理组(10±3)和空载体转染组(11±2)中细胞凋亡的数目(P＜0.05);此外,RT-PCR和Western印迹结果表明Notch1 siRNA转染组中裸鼠肿瘤组织Notch1和bcl-2mRNA和蛋白表达均显著下降,而bax的表达显著上升,3组间比较差异具有统计学意义(均P ＜0.05).结论 降低Notch1基因的表达能抑制人肝细胞癌细胞HepG2裸鼠皮下移植瘤的生长,诱导HepG2细胞凋亡,后者可能与bax表达的上升和bcl-2表达的下调相关.

关键词：Notch1、肝细胞癌、细胞凋亡、RNA干扰

所属期刊栏目：22

分类号：R-332(医学研究方法)

在线出版日期：2016-01-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：15-19