PIAS-NY酵母双杂交诱饵载体的构建及其自激活活性分析

摘要：

目的 构建PIAS-NY(protein inhibitor of activated STAT-NY,PIAS-NY)的诱饵载体,为应用酵母双杂交系统筛选与PIAS-NY相互作用的蛋白建立实验基础.方法 应用PCR法扩增PIAS-NY编码序列的片段,先将其克隆入pGEMT-easy内,经序列测定确认无误后,再将片段亚克隆入pGBKT7载体内,将构建好的诱饵载体pGBKT7-PIAS-NY转化到酵母细胞AH109及Y187中,进行诱饵载体的毒性及自激活活性分析.结果 构建了PIAS-NY的诱饵载体,经过自激活活性的分析发现,该诱饵载体没有自激活活性,同时对两种酵母细胞的生长无毒性作用.结论 成功构建了PIAS-NY的酵母双杂交诱饵表达载体,为进一步筛选与之相互作用的蛋白提供了实验基础.

关键词：酵母双杂交、PIAS-NY、载体构建

所属期刊栏目：21

分类号：R339.2(人体生理学)

资助基金：国家自然科学基金31071020;江苏省自然科学基金BK2009192

在线出版日期：2012-05-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：3971-3974