Tie2基因RNA干扰慢病毒表达载体的构建与鉴定

摘要：

目的 构建并鉴定Tie2基因的RNA干扰慢病毒表达我体.方法 先构建pNL-EGFP-U6-Tie2-siRNA慢病毒转移质粒,通过Xba I酶切电泳及测序鉴定,再以pNL-EGFP- U6- Tie2-siRNA慢病毒转移质粒,pVSVG包膜质粒和pHelper包装质粒三质粒共转染293T细胞,产生慢病毒,收集病毒上清液并测定病毒滴度.结果 成功构建pNL-EGFP-U6-Tie2-siRNA慢病毒转移质粒2条,通过Xba I酶切及测序鉴定,Tie2-siRNA核苷酸序列插入正确,利用三质粒慢病毒包装系统生产EGFP-Tie2-siRNA病毒,收集病毒上清,并测得病毒滴度为9×103/μL.结论 成功构建了Tie2基因的RNA干扰慢病毒表达载体.

关键词：RNA干扰、促血管生成素2、Tie2受体、慢病毒载体、质粒载体

所属期刊栏目：21

分类号：R3(基础医学)

资助基金：卫生部科学研究基金一福建省卫生教育联合攻关计划项目WKJ2008-2-51

在线出版日期：2012-03-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：2969-2973