蛋白激酶SGK2α在大肠杆菌中的表达纯化及抗体制备

摘要：

目的 该研究通过SGKα基因的克隆、原核蛋白表达以及纯化,制备抗SGK2α抗体,为进一步研究SGK2α蛋白的生物学功能奠定基础.方法 利用原核表达载体PGEX-4T-3构建重组质粒,并在大肠杆菌中通过IPTG诱导表达;亲和层析法纯化重组蛋白:以纯化的重组蛋白为抗原免疫新西兰大耳白兔制备抗SGK2α多克隆抗体,ELISA方法检测抗体效价,免疫印迹法检测抗体的特异性.结果 构建了PGEX-4T-3-SGK2α原核表达质粒,经原核表达和亲和层析获得GST-SGK2α融合蛋白,蛋白纯度在90%以上;利用GST-SGK2α融合蛋白制备多克隆抗体,抗体效价阳性且具有较强的特异性.结论 利用原核表达的GST-SGK2α融合蛋白成功地制备了抗SGK2α多克隆抗体,可用于免疫组织化学和免疫印迹检测以及功能研究.

关键词：SGK2α、重组蛋白纯化、多克隆抗体

所属期刊栏目：20

分类号：Q71(生物大分子的结构和功能)

资助基金：国家自然科学基金;黑龙江省教育厅项目

在线出版日期：2016-01-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1765-1768