铜绿假单胞菌外毒素A原核表达载体的构建及表达

摘要：

目的 对铜绿假单胞茵外毒素A(PEA)全基因进行基因克隆,构建原核表达质粒并进行表达.方法 从铜绿假单胞茵中提取基因组DNA,设计PCR引物扩增出带信号肽的PEA目的 基因,经HindⅢ和EcoR Ⅰ消化后,与PET-32a裁体进行连接重组.用限制性内切酶消化、PCR及DNA测序等方法鉴定构建成功后.IPTG诱导目的 基因表达.结果 SDS-PAGE电泳结果显示,在分子量78 KD处有一条明显的新生蛋白带.表达的融合蛋白量约占细茵总蛋白的35%.结论 PET-32a-PEA原核表达质粒的成功构建及表达.为进一步研究有效的基因工程疫苗和免疫导向治疗的基因重组毒素奠定了基础.

关键词：铜绿假单胞茼、外毒素A、重组质粒、基因表达

所属期刊栏目：18

分类号：R37(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

在线出版日期：2016-01-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：2772-2774