结核分支杆菌ESAT6蛋白的表达、纯化及抗原性研究

摘要：

目的:获得重组ESAT6蛋白,研究其免疫学特性,评价其在结核病血清学诊断中的价值.方法:分别用生理盐水和卡介苗免疫小鼠8周后,以结核分支杆菌接种小鼠.应用基因工程技术表达、纯化ESAT6蛋白,分别以结核分支杆菌PPD或纯化的rESAT6蛋白为抗原,通过ELISA方法及结核病一步法检测小鼠或人血清中抗结核抗体.结果:重组质粒pET24b-ESAT6在大肠杆菌BL2(DE3)细胞内以包涵体形式存在,分子量约6kDa,每100ml培养菌可获得约18mg纯化的重组蛋白.生理盐水和卡介苗免疫小鼠血后血清中抗ESAT6抗体无区别;结核分支杆菌攻击后,两组小鼠血清中抗ESAT6抗体均明显升高,但只有卡介苗组小鼠抗体水平超过平均值+2标准误.以33例正常人血清的OD值+2S为正常界限值,33例正常人和32例结核病人血清一步法和PDD、rESAT6 ELISA检测抗结核抗体的特异性和敏感性分别为:一步法87.9%(29/33)、65.6%(21/32);PPD 93.9%(31/33)、62.5%(20/32);rESAT6 97%(32/33)、18.2%(4/32).结论:pET24b-ESAT6大肠杆菌工程菌能以包涵形式高效表达重组ESAT6蛋白,卡介苗免疫对血清中抗ESAT6抗体无影响,结核病人血清中抗ESAT6抗体阳性率低,rESAT6纯化蛋白可作为结核病血清学诊断的混合抗原之一.

关键词：ESAT6、基因表达、血清学诊断、分支杆菌、结核

所属期刊栏目：11

分类号：R52(结核病)

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：14-17