4种急性肝缺血/再灌注损伤大鼠模型的建立及适用性比较

摘要：

目的:明确4种肝缺血/再灌注损伤（IRI）大鼠模型的制备方法，确定与临床情况相符、病理生理损伤程度稳定、易于操作的肝IRI动物模型。方法:将160只雄性SD大鼠采用区间分组法随机分为70% IRI（A组）、100% IRI（B组）、70% IRI+30%肝切除（C组）、100% IRI+30%肝切除（D组）4种模型组，每组40只；每种模型再按缺血时间随机分为假手术组（s组）和缺血30、60、90 min组，每组10只。术后观察大鼠生存状态、苏醒时间；记录C、D组切除肝叶质量、出血量、止血时间。于再灌注6 h经心脏穿刺取血，检测血清天冬氨酸转氨酶（AST）、丙氨酸转氨酶（ALT）、碱性磷酸酶（ALP）、血尿素氮（BUN）、血肌酐（SCr）、γ-谷氨酰转肽酶（γ-GT）水平，判断肝肾功能损伤情况；采用苏木素-伊红（HE）染色、免疫组化巨噬细胞染色，从病理学角度分析肝组织结构损伤情况。结果:A组大鼠苏醒早，精神尚可；余组大鼠苏醒晚且精神欠佳。D组止血时间平均较C组长1 s左右。70%肝缺血60 min组大鼠的死亡率为0。与假手术组比较，各实验组大鼠血清AST、ALT、ALP、BUN、SCr、γ-GT水平明显增高，提示肝IRI大鼠肝肾功能受损；A、B、C 3组中缺血90 min组较缺血30 min组AST、ALT、ALP、BUN、SCr、γ-GT升高更明显〔AST（U/L）：A组为834.94±56.73比258.74±18.33，B组为547.63±217.40比277.67±57.92，C组为930.38±75.48比640.51±194.20；ALT（U/L）：A组为346.78±25.47比156.58±13.25，B组为408.40±138.25比196.80±58.60，C组为596.41±193.32比173.76±72.43，ALP（U/L）：A组为431.21±34.30比315.95±15.64，B组为525.88±62.13比215.63±17.31，C组为487.53±112.37比272.46±92.33，BUN（U/L）：A组为18.35±5.63比14.32±2.30，B组为30.21±4.55比17.41±8.14，C组为20.50±3.64比15.93±3.22，SCr（U/L）：A组为27.47±8.91比22.37±5.66，B组为43.60±15.57比36.80±7.95，C组为63.81±20.24比42.47±7.03，γ-GT（U/L）：A组为15.64±3.57比6.82±1.48，B组为9.28±1.91比5.62±1.21，C组为10.98±3.18比5.67±1.10，均
P<0.05〕；100% IRI 90 min组和100% IRI 90 min+30%肝切除组较相应70% IRI对照组上述指标升高更明显，说明血流阻断+肝切除的大鼠肝肾功能损害增加。HE染色可见假手术组肝组织结构清晰，细胞完整，排列整齐；各实验组细胞结构破坏，出现断裂或塌陷，细胞水肿，部分细胞有核固缩、胞质深染，脱落坏死，间质有炎症细胞浸润。免疫组化染色可见各实验组巨噬细胞多于假手术组。
结论:成功建立4种肝IRI大鼠模型，随着肝缺血时间延长和缺血程度加大，肝细胞缺血加重，肝细胞缺氧坏死增加，符合肝IRI的特点，能完美模拟肝外伤后的肝IRI，其中100%缺血+30%肝切除组肝损伤最为严重。该模型设计合理、操作简单、重复性好，可用于临床机制、药物疗效及诊疗方法的探究。

关键词：大鼠、急性肝缺血/再灌注损伤、模型制备、适用性

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资助基金：军队基础加强计划技术领域基金项目2019-JCJQ-JJ-143;Military Basic Strengthening Program Technological Field Fund Project2019-JCJQ-JJ-143

在线出版日期：2023-07-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：604-609