TubA对猪心肺复苏后肾肠损伤的保护作用及机制

摘要：

目的:探讨组蛋白去乙酰化酶6特异性抑制剂Tubastatin A（TubA）减轻猪心肺复苏（CPR）后肾肠损伤的保护作用及其潜在机制。方法:将25只健康雄性大白猪按照随机数字表法分为假手术（Sham）组（
n＝6）、CPR模型组（
n＝10）及TubA干预组（
n＝9）。经右心室电刺激诱导心搏骤停9 min后CPR 6 min制备猪CPR模型；Sham组动物仅进行插管通气、置管、麻醉监护等常规操作。TubA干预组于复苏成功后5 min经股静脉泵入TubA 4.5 mg/kg，持续1 h；Sham组和CPR模型组泵入等量生理盐水。分别于制模前及复苏后1、2、4、24 h取静脉血，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血肌酐（SCr）、血尿素氮（BUN）、肠型脂肪酸结合蛋白（I-FABP）和二胺氧化酶（DAO）血清水平。于复苏后24 h取左肾上极与回肠末端组织，采用原位末端缺刻标记法（TUNEL）检测细胞凋亡程度，并采用蛋白质免疫印迹试验（Western blotting）检测受体相互作用蛋白3（RIP3）和混合谱系激酶域样蛋白（MLKL）的表达水平。
结果:与Sham组相比，CPR模型组和TubA干预组动物均在复苏后出现肾功能障碍与肠黏膜损伤，表现为SCr、BUN、I-FABP和DAO的血清水平均明显增加；然而，与CPR模型组相比，TubA干预组复苏后1 h起SCr与DAO、复苏后2 h起BUN、复苏后4 h起I-FABP的血清水平均显著降低〔1 h SCr（μmol/L）：87±6比122±7，1 h DAO（kU/L）：8.1±1.2比10.3±0.8，2 h BUN（mmol/L）：12.3±1.2比14.7±1.3，4 h I-FABP（ng/L）：661±39比751±38，均
P<0.05〕。组织检测分析显示，与Sham组相比，CPR模型组和TubA干预组动物均在复苏后24 h出现肾肠组织细胞凋亡与坏死性凋亡，表现为细胞凋亡指数均明显升高，RIP3和MLKL蛋白表达均显著上调；然而，与CPR模型组相比，TubA干预组复苏后24 h肾肠组织细胞凋亡指数均明显降低〔肾组织细胞凋亡指数：（21.4±4.6）%比（55.2±9.5）%，肠组织细胞凋亡指数：（21.3±4.5）%比（50.9±7.0）%，均
P<0.05〕，RIP3和MLKL蛋白表达均显著下调〔肾组织：RIP3蛋白（RIP3/GAPDH）为1.11±0.07比1.39±0.17，MLKL蛋白（MLKL/GAPDH）为1.20±0.14比1.51±0.26；肠组织：RIP3蛋白（RIP3/GAPDH）为1.24±0.18比1.69±0.28，MLKL蛋白（MLKL/GAPDH）为1.38±0.15比1.80±0.26，均
P<0.05〕。
结论:TubA具有减轻复苏后肾功能障碍与肠黏膜损伤的保护作用，其机制可能与抑制细胞凋亡和坏死性凋亡有关。

关键词：心搏骤停、心肺复苏、肾功能障碍、肠黏膜损伤、Tubastatin A、坏死性凋亡、凋亡

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在线出版日期：2023-07-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：398-403