Alda-1通过调控ACSL4/GPx4铁死亡途径减轻猪心肺复苏后脑损伤

摘要：

目的:探讨乙醛脱氢酶2特异性激活剂Alda-1是否通过抑制长链脂酰辅酶A合成酶4?/谷胱甘肽过氧化物酶4（ACSL4/GPx4）通路介导的铁死亡过程来减轻猪心肺复苏（CPR）后脑损伤。方法:将22只普通级健康雄性白猪按照随机数字表法分为假手术（Sham）组（
n＝6）、CPR模型组（
n＝8）和Alda-1干预组（CPR+Alda-1组，
n＝8）。采用经右心室电刺激致颤诱导心搏骤停8 min后CPR 8 min的方法制备猪CPR模型；Sham组仅进行相关准备操作。CPR+Alda-1组于复苏后5 min静脉注射Alda-1 0.88 mg/kg；Sham组和CPR模型组注射等量生理盐水。各组分别于制模前及复苏后1、2、4、24 h取股静脉血，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测神经元特异性烯醇化酶（NSE）和S100β蛋白的血清水平。于复苏后24 h采用神经功能缺损评分（NDS）评估动物神经功能状态；然后处死动物取大脑皮质，采用普鲁士蓝染色法检测铁沉积水平，采用比色法检测丙二醛（MDA）和还原型谷胱甘肽（GSH）含量，采用蛋白质免疫印迹试验（Western blotting）检测ACSL4及GPx4的蛋白表达水平。
结果:与Sham组比较，CPR模型组和CPR+Alda-1组NSE及S100β血清水平均随复苏后时间延长呈持续升高趋势，且复苏后24 h NDS评分及大脑皮质铁沉积水平和MDA含量明显升高，大脑皮质GSH含量及GPx4蛋白表达明显下降，ACSL4蛋白表达明显上调，说明CPR术后大脑皮质细胞发生铁死亡，且ACSL4/GPx4通路参与该组织细胞铁死亡的过程。与CPR模型组比较，CPR+Alda-1组复苏后2 h起NSE及S100β血清水平即明显降低〔NSE（μg/L）：24.1±2.4比28.2±2.1，S100β（ng/L）：2?279±169比2?620±241，均
P<0.05〕，且复苏后24 h NDS评分及大脑皮质铁沉积水平和MDA含量明显降低〔NDS评分（分）：120±44比207±68，铁沉积：（2.61±0.36）%比（6.31±1.66）%，MDA（μmol/g）：2.93±0.30比3.68±0.29，均
P<0.05〕，大脑皮质GSH含量及GPx4蛋白表达明显升高〔GSH（mg/g）：4.59±0.63比3.51±0.56，GPx4蛋白（GPx4/GAPDH）：0.54±0.14比0.21±0.08，均
P<0.05〕，ACSL4蛋白表达明显下调（ACSL4/GAPDH：0.46±0.08比0.85±0.13，
P<0.05），说明Alda-1可能通过调控ACSL4/GPx4通路减轻猪CPR后大脑皮质细胞铁死亡程度。
结论:Alda-1可减轻猪CPR后脑损伤，该保护作用可能与抑制ACSL4/GPx4通路介导的铁死亡过程有关。

关键词：心肺复苏、脑损伤、Alda-1、铁死亡

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资助基金：浙江省医药卫生科技计划项目2019KY258，2020KY005;Zhejiang Provincial Medical and Health Science and Technology Planning Project2019KY258, 2020KY005

在线出版日期：2023-07-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：376-380