内源性孤啡肽通过RKIP影响大鼠缺血性心律失常的发生

摘要：

目的 探讨内源性孤啡肽(N/OFQ)是否通过Raf激酶抑制蛋白(RKIP)影响急性心肌缺血大鼠心律失常及心肌细胞膜表面 β1-肾上腺素能受体(β1-AR)的表达.方法 ①实验一:按随机数字表法将30只6周龄成年雄性SD大鼠分为假手术组〔Sham组,只开胸不结扎冠状动脉(冠脉)〕、心肌缺血模型组(结扎冠脉左前降支)、内源性N/OFQ拮抗剂UFP-101预处理组(UFP-101组,术前10 min经尾静脉注射1 mL/kg UFP-101),每组10只.记录各组大鼠术后15 min内心律失常结果;术后15 min取缺血心肌,采用蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测磷酸化RKIP(p-RKIP)表达.②实验二:按随机数字表法将30只4周龄雄性SD大鼠分为UFP-101对照组、RKIP过表达组、RKIP拮抗组,每组10只.UFP-101对照组每日腹腔注射玉米油,其余两组注射RKIP上调剂香蜂草苷(Didymin),3组大鼠饲养4周后均行冠脉结扎,并均于术前10 min经尾静脉注射UFP-101.其中RKIP拮抗组术前2 h腹腔注射RKIP特异性拮抗剂洛法他丁(locostatin).记录各组大鼠术后15 min内心律失常结果;Western Blot法检测术后15 min时心肌组织p-RKIP表达及心肌细胞膜表面 β1-AR表达.结果 ①实验一:与Sham组比较,模型组和UFP-101组室性期前收缩(VEB)、室性心动过速(VT)、心室纤颤(VF)发生明显增多,心律失常评分明显升高;此外,与Sham组相比,模型组心肌组织p-RKIP表达升高,UFP-101组心肌组织p-RKIP表达下降.与模型组比较,UFP-101预处理可显著减少心律失常发生〔心律失常评分(分):1.5(0.3,5.0)比4.0(2.0,5.0),P<0.05〕,心肌组织p-RKIP表达明显下降(p-RKIP/总RKIP:0.20±0.11比0.43±0.11,P<0.05).说明拮抗N/OFQ能降低RKIP的磷酸化,减少心律失常发生.②实验二:与UFP-101对照组相比,RKIP过表达可显著增加心律失常事件发生,心肌细胞膜表面β1-AR表达也明显增多;而拮抗RKIP过表达可使心律失常的发生有所缓解〔心律失常评分(分):3.0(2.0,3.0)比4.0(2.0,5.0),P<0.05〕,并且明显减少心肌细胞膜表面β1-AR的表达(β1-AR/Na+-K+-ATP酶:0.88±0.09比1.02±0.08,均P<0.05),而总RKIP表达差异无统计学意义(总RKIP/GAPDH:5.40±0.21比5.36±0.19,P>0.05).说明内源性N/OFQ通过RKIP影响大鼠缺血性心律失常和心肌细胞膜表面β1-AR表达.结论 内源性N/OFQ可通过增加RKIP磷酸化表达来影响大鼠缺血心肌细胞膜表面β1-AR的表达及心律失常.

关键词：心律失常、心肌缺血、孤啡肽、Raf激酶抑制蛋白、β1-肾上腺素能受体

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资助基金：国家自然科学基金;山西省青年科技研究基金;National Natural Science Foundation of China ;Natural Science Foundation for Young Scientists of Shanxi Province of China

在线出版日期：2020-03-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1474-1478