微小RNA-181b对脓毒症老龄大鼠海马组织的保护作用

摘要：

目的 观察微小RNA-181b(miR-181b)对脓毒症老龄大鼠海马组织的保护作用.方法 取健康老龄雄性SD大鼠75只,采用随机数字表法分为假手术组(Sham组)、脓毒症组〔盲肠结扎穿孔术(CLP)组〕、miR-181b模拟物(Agomir)+CLP组(Ag+CLP组)、miR-181b抑制物(Antagomir)+CLP组(An+CLP组)和生理盐水(NS)对照组(NS+CLP组)5组,每组15只.采用CLP制备大鼠脓毒症模型;Sham组大鼠开腹后仅分离盲肠,不进行结扎和穿孔.Ag+CLP组于术前24 h经侧脑室注射miR-181b Agomir 10 μL ;An+CLP组注射miR-181b Antagomir 10 μL ;NS+CLP组注射NS 10 μL.各组分别于术后6、12、24 h处死5只大鼠,取海马组织,用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-181b表达水平;用蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测核转录因子-κB p65(NF-κB p65)表达水平;用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量.结果 与Sham组比较,CLP组大鼠术后6 h海马组织miR-181b表达水平即明显降低(2-ΔΔCT :0.70±0.12比0.98±0.06,P＜0.05),NF-κB p65表达及IL-1β、TNF-α含量即明显升高〔NF-κB p65/Histone H3:0.30±0.03比0.07±0.01,IL-1β(ng/L):120.39±8.02比50.55±11.12, TNF-α(ng/L):59.48±4.60比40.31±3.96,均P＜0.05〕,并持续至24 h.表明脓毒症大鼠海马组织存在明显的炎症反应.NS+CLP组大鼠术后各时间点海马组织miR-181b、NF-κB p65、IL-1β、TNF-α表达水平与CLP组比较差异均无统计学意义,表明经侧脑室注射NS不会加重脓毒症大鼠海马组织的炎症反应程度.与CLP组比较,Ag+CLP组大鼠术后6 h海马组织miR-181b表达水平即明显升高(2-ΔΔCT :1.87±0.25比0.70±0.12, P＜0.05),NF-κB p65表达及IL-1β、TNF-α含量即明显降低〔NF-κB p65/Histone H3:0.16±0.03比0.30±0.03, IL-1β(ng/L):73.76±8.17比120.39±8.02,TNF-α(ng/L):49.52±4.77比59.48±4.60,均P＜0.05〕;而An+CLP组大鼠术后各时间点海马组织miR-181b表达与CLP组比较差异均无统计学意义(2-ΔΔCT :6 h为0.80±0.08比0.70±0.12,12 h为0.48±0.03比0.46±0.05,24 h为0.61±0.09比0.63±0.07,均P＞0.05),NF-κB p65表达及IL-1β、TNF-α含量于术后6 h即较CLP组明显升高〔NF-κB p65/Histone H3 :0.44±0.02比0.30±0.03,IL-1β (ng/L):134.21±5.78比120.39±8.02,TNF-α(ng/L):67.62±5.86比59.48±4.60,均P＜0.05〕,并持续至24 h.说明过表达miR-181b可以抑制NF-κB通路激活,减少IL-1β和TNF-α的产生,减轻脓毒症大鼠海马组织炎症反应.结论 脓毒症大鼠海马组织miR-181b水平明显降低;上调脓毒症老龄大鼠海马组织miR-181b水平可抑制NF-κB通路激活,减少炎性因子IL-1β和TNF-α的产生,抑制炎症反应,减轻海马组织损伤.

关键词：微小RNA-181b、体内转染、脓毒症、海马、中枢炎症

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资助基金：国家自然科学基金81571938,81501706 Fund program: National Natural Science Foundation of China 81571938, 81501706

在线出版日期：2019-09-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：857-861