益肾活血方通过miR-126/VEGF-Notch信号通路改善肾纤维化

摘要：

目的 探讨益肾活血方通过调控微小RNA-126/血管内皮生长因子- Notch(miR-126/VEGF-Notch)信号通路延缓肾纤维化发展的分子机制.方法 按照随机数字表法将90只雄性SD大鼠平均分为假手术(Sham)组、单侧输尿管结扎术(UUO)模型组、氯沙坦治疗组(50 mg·kg-1·d-1)以及高、中、低剂量益肾活血方治疗组(25.2、12.6、6.3 mL/kg).各治疗组于UUO制模结束当日开始灌胃给药,直至实验结束.术后7、14、21 d取大鼠左侧肾脏,用苏木素-伊红(HE)和Masson染色于镜下观察肾组织病理学改变,并计算肾纤维化评分;用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肾组织miR-126、血管内皮生长因子A(VEGFA)、血管内皮生长因子受体2 (VEGFR-2)、Notch1的mRNA表达.结果 ① 病理结果:Sham组肾组织形态正常.UUO模型组肾小管扩张,肾间质炎性细胞增多,术后7 d即可见肾小管间质纤维化,并随时间延长程度逐渐加重;术后各时间点肾纤维化评分较Sham组明显增高.各治疗组肾脏肿胀程度、肾实质萎缩等均较UUO模型组有所改善;中、高剂量益肾活血方组和氯沙坦组术后7 d肾纤维化评分即明显低于UUO模型组(分:1.00±1.00、0.91±0.58、1.01±0.58比2.00±0.00,均P＜0.01),而低剂量益肾活血方组肾纤维化评分与UUO模型组无明显差异.② RT-PCR结果:UUO模型组术后各时间点肾组织miR-126、VEGFA、VEGFR-2及Notch1的mRNA表达量均较Sham组明显升高.与UUO模型组比较,中、高剂量益肾活血方组和氯沙坦组术后7 d肾组织miR-126、VEGFA、VEGFR-2及Notch1的mRNA表达量即明显升高〔miR-126(2-ΔΔCt):0.465±0.067、0.639±0.092、0.404±0.069比0.132± 0.021,VEGFA(2-ΔΔCt):0.024±0.005、0.027±0.007、0.023±0.006 比 0.014±0.006,VEGFR-2(2-ΔΔCt):0.021±0.007、0.023±0.008、0.019±0.007 比 0.012±0.004,Notch1(2-ΔΔCt):0.017±0.004、0.020±0.005、0.018±0.005比0.007±0.004,均P＜0.05〕,且中、高剂量益肾活血方组各指标基因表达量较氯沙坦组有一定上升趋势(但P＞0.05);而低剂量益肾活血方组各指标基因表达量与UUO模型组比较差异无统计学意义.结论中、高剂量益肾活血方可以有效拮抗肾纤维化,其机制可能是通过上调miR-126/VEGF-Notch信号通路,从而介导肾脏微血管新生,最终改善肾微血管损伤和延缓肾纤维化进程.

关键词：微小RNA、血管内皮生长因子、Notch信号通路、益肾活血方、肾纤维化

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资助基金：国家自然科学基金81360536;广西自然科学基金2016GXNSFAA380047 National Natural Science Foundation of China81360536;Guangxi Natural Science Foudation of China2016GXNSFAA380047

在线出版日期：2018-12-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：991-995