吡咯烷二硫代氨基甲酸酯对ALI小鼠肺组织氧化应激及线粒体功能的影响

摘要：

目的 探讨吡咯烷二硫代氨基甲酸酯(PDTC)对脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤(ALI)小鼠肺组织氧化应激及线粒体功能的影响.方法 按随机数字表法将40只雌性Balb/c小鼠分为生理盐水(NS)对照组、LPS模型组、PDTC组和PDTC+LPS组,每组10只.腹腔注射LPS 15 mg/kg诱导ALI小鼠模型;PDTC+LPS组于注射LPS前1 h腹腔注射PDTC 50 mg/kg进行预处理;NS对照组仅腹腔注射NS 0.1 mL,PDTC组仅腹腔注射PDTC 50 mg/kg.制模24 h后处死小鼠取肺组织,应用光谱光度测量工具测定肺组织总抗氧化能力(T-AOC),采用硫代巴比妥酸法测定肺组织丙二醛(MDA)含量,采用蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测肺组织超氧化物歧化酶(SOD1、SOD2)和过氧化氢酶(CAT)的蛋白表达.分离肺组织线粒体,采用荧光素酶/荧光素测量方法测定线粒体三磷酸腺苷(ATP)含量,采用罗丹明法测定线粒体膜电位(ΔΨm),采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测线粒体解耦联蛋白(UCPs)的mRNA表达.结果 LPS刺激可明显加剧小鼠肺组织氧化应激水平,导致线粒体功能障碍,表现为肺组织T-AOC和SOD1蛋白表达降低,MDA水平升高,线粒体ATP合成减少,ΔΨm下降,UCP2 mRNA表达降低;而肺组织SOD2、CAT和线粒体UCP1、UCP3表达无明显变化.给予PDTC预处理可明显缓解LPS诱导的肺组织氧化应激水平升高,减轻线粒体功能障碍,与LPS模型组比较,肺组织T-AOC明显升高(U/g:0.35±0.08比0.31±0.07),MDA水平明显下降(μmol/mg:13.29±1.13比17.54±1.72),SOD1蛋白表达明显升高(SOD1蛋白:1.13±0.11比0.71±0.09),线粒体ATP合成明显增加(μmol/mg:49.23±5.42比36.92±2.21),ΔΨm明显升高(mV:226.03±11.69比194.86±7.79),UCP2 mRNA表达明显升高(2-ΔΔCt:0.88±0.06比0.73±0.04),差异均有统计学意义(均P<0.05).此外,PDTC单独处理对正常小鼠肺组织也有抗氧化、减轻氧化应激、促进线粒体ATP合成的作用,与NS对照组比较,肺组织T-AOC明显升高(U/g:0.49±0.09比0.43±0.06),MDA明显下降(μmol/mg:10.27±1.25比12.17±1.36),SOD2和CAT蛋白表达明显升高(SOD2蛋白:1.33±0.08比1.00±0.11,CAT蛋白:1.39±0.08比1.00±0.11),线粒体ATP合成明显增加(μmol/mg:61.53±4.92比53.33±3.20),差异均有统计学意义(均P<0.05);但对肺组织SOD1蛋白表达及线粒体ΔΨm和UCPs mRNA表达无明显影响.结论 LPS可诱导ALI小鼠肺组织氧化应激,并通过抑制ATP合成导致线粒体功能障碍;PDTC预处理对LPS诱导的ALI小鼠肺组织有抗氧化作用,可减轻线粒体功能障碍.

关键词：急性肺损伤、氧化应激、线粒体功能障碍、抗氧化能力、丙二醛、超氧化物歧化酶

所属期刊栏目：30

资助基金：国家临床重点专科建设项目2011-873National Clinical Key Specialist Construction Project2011-873

在线出版日期：2018-06-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：428-433