慢病毒介导VEGF165转染的内皮祖细胞移植可减轻大鼠ALI

摘要：

目的 探讨慢病毒介导血管内皮生长因子165(VEGF165)转染的内皮祖细胞(EPCs)移植在大鼠急性肺损伤(ALI)中的保护作用.方法 分离培养雄性SD大鼠单核细胞获得EPCs备用.构建携带人VEGF165基因的慢病毒载体.按随机数字表法将90只雄性SD大鼠分为ALI模型组、磷酸盐缓冲液(PBS)组、EPCs干预组、空载质粒EPCs干预组、VEGF165转染EPCs干预组,每组再分为4、12、48 h 3个时间点亚组,每个亚组6只.经尾静脉注射0.15 μL/g油酸建立大鼠ALI模型;各干预组经尾静脉相应给予PBS、EPCs、空载质粒EPCs和VEGF165转染EPCs各0.2 mL(含细胞数1×106).分别于各时间点取大鼠腹主动脉血进行血气分析;取左肺组织计算肺湿/干重比值(W/D),用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肺组织诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、内皮素-1(ET-1)、VEGF165表达;苏木素-伊红(HE)染色后,光镜下观察肺组织病理学改变并进行肺损伤评分.结果 与ALI模型组比较,EPCs、空载质粒EPCs和VEGF165转染EPCs治疗组4 h开始动脉血氧分压(PaO2)明显升高,肺W/D比值及肺组织iNOS和ET-1表达均明显下降,VEGF165表达明显升高.与EPCs干预组比较,VEGF165转染EPCs干预组PaO2升高、肺W/D比值及肺组织iNOS和ET-1表达下降、以及VEGF165表达升高均随时间延长更加显著〔4 h:PaO2(mmHg,1 mmHg=0.133 kPa)为82.84±10.69比72.34±9.36,肺W/D为4.83±0.23比5.55±0.37,iNOS(ng/mg)为8.77±1.10比14.84±1.34,ET-1(ng/mg)为103.41±5.66比153.08±5.12,VEGF165(ng/mg)为130.56±12.16比83.03±5.95;12 h:PaO2(mmHg)为91.67±6.81比78.50±8.81,肺W/D比值为4.44±0.35比5.32±0.25,iNOS(ng/mg)为7.23±0.24比14.04±1.18,ET-1(ng/mg)为91.98±3.52比125.99±7.55,VEGF165(ng/mg)为164.49±5.71比96.61±6.12〕;48 h个别指标达到谷值或峰值〔肺W/D:4.26±0.30比4.89±0.15,iNOS(ng/mg):5.79±0.85比12.72±1.10,ET-1(ng/mg):74.53±7.10比108.33±5.84,VEGF165(ng/mg):237.43±10.79比134.24±11.99,均P<0.05〕.随时间延长,各组肺组织损伤逐渐加重,肺损伤评分逐渐升高,48 h EPCs、空载质粒EPCs和VEGF165转染EPCs干预组肺损伤评分已明显低于ALI模型组,且VEGF165转染EPCs干预组评分低于EPCs干预组(分:8.50±1.05比10.50±1.05, P<0.05).结论 慢病毒介导VEGF165转染的EPCs移植可明显改善ALI大鼠的氧合,减轻肺水渗出,降低肺组织iNOS、ET-1表达,从而对肺组织起到明显保护作用.

关键词：血管内皮生长因子、内皮祖细胞、急性肺损伤、慢病毒、细胞转染

所属期刊栏目：29

分类号：S85;R37

资助基金：江西省自然科学基金2013ZBAB205014Fund program: Natural Science Foundation of Jiangxi Province of China 2013ZBAB205014

在线出版日期：2017-12-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1015-1020