HMGB1对大鼠心肌缺血/再灌注损伤后内质网应激的影响

摘要：

目的 探讨高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对心肌缺血/再灌注(I/R)损伤后内质网应激(ERS)的影响.方法 按随机数字表法将40只雄性SD大鼠分为假手术组、I/R模型组、基因沉默(HMGB1-siRNA)组和空载体(Scrambled-siRNA)组,每组10只.结扎冠状动脉(冠状)血流30 min、再灌注2 h建立心肌I/R损伤大鼠模型;假手术组不进行结扎.各组分别于术前24、12、0 h采用水压法经尾静脉相应注射磷酸盐缓冲液(PBS)、HMGB1-siRNA或Scrambled-siRNA混合液各1 mL进行预处理;再灌注2 h后取血并处死大鼠取心肌组织.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL-6、IL-8)水平;用免疫组化法检测心肌损伤部位HMGB1蛋白表达;用蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)和实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测心肌组织HMGB1以及ERS相关因子,如糖调节蛋白78(GRP78)、增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶12(caspase-12)的蛋白和mRNA表达.结果 I/R可使大鼠血清炎性因子水平和HMGB1阳性细胞以及心肌组织GRP78、CHOP、caspase-12的蛋白和mRNA表达较假手术组明显增加.HMGB1-siRNA预处理后可致大鼠血清炎性因子水平较I/R模型组明显降低〔TNF-α(ng/L):783.4±203.4比963.9±214.1,IL-6(ng/L):358.8±94.8比452.3±103.7,IL-8(ng/L):180.5±73.6比347.3±90.3,均P<0.05〕,HMGB1阳性细胞以及心肌组织GRP78、CHOP、caspase-12的蛋白和mRNA表达也明显低于I/R模型组(HMGB1蛋白:1.59±0.26比3.21±0.40,GRP78蛋白:2.59±0.28比4.21±0.42,CHOP蛋白:2.01±0.23比3.21±0.43,caspase-12蛋白:1.48±0.22比3.01±0.48;HMGB1 mRNA:2.35±0.26比4.67±0.45,GRP78 mRNA:6.59±0.26比11.21±0.40,CHOP mRNA:2.01±0.43比5.21±0.63,caspase-12 mRNA:4.48±0.32比8.41±0.52,均P<0.05).Scrambled-siRNA组各指标与I/R模型组比较差异均无统计学意义.结论 HMGB1可能参与了大鼠心肌I/R损伤中ERS的激活,从而加重心肌细胞损伤.

关键词：高迁移率族蛋白B1、缺血/再灌注、心、炎性因子、内质网应激

所属期刊栏目：29

分类号：R57;R28

资助基金：内蒙古自治区自然科学基金2016MS0867 Inner Mongolia Autonomous region Natural Science Foundation of China 2016MS0867

在线出版日期：2017-10-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：916-920