微小RNA-21抑制剂对高氧性急性肺损伤大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞凋亡的影响

摘要：

目的 观察微小RNA-21(miR-21)抑制剂对高氧性急性肺损伤(HALI)大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞(AECⅡ)凋亡的影响.方法 将80只SD大鼠按随机数字表法分为空气对照组、高氧损伤组、空病毒对照组(经鼻腔滴入200μL慢病毒液)及miR-21抑制剂预处理组(经鼻腔滴入200 μL含miR-21抑制剂的慢病毒液),每组20只;各组大鼠给予相应处理后立即置于氧浓度＞90％的高氧箱中饲养以建立HALI模型;空气对照组正常饲养且不予任何处理.各组分别于高氧暴露0、24、48、72 h随机取10只大鼠,观察双肺组织大体变化,光镜下观察病理学改变.另于48 h取10只大鼠肺组织,采用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-21表达,采用蛋白质免疫印迹试验(Western Bolt)检测天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)蛋白表达,采用原位末端缺刻标记试验(TUNEL)检测AECⅡ凋亡情况.结果 ①空气对照组各时间点肺组织无异常表现.随高氧暴露时间延长,高氧损伤组肺组织损伤逐渐加重,72 h肺组织呈暗红色,多处斑片状出血,肺组织结构紊乱,出现肺泡壁断裂,肺泡间隔明显水肿、增宽,大量炎性细胞浸润,肺泡腔内出现水肿液.miR-21抑制剂预处理组肺组织损伤程度较高氧损伤组进一步加重;而空病毒对照组无明显变化.②与空气对照组比较,高氧损伤组肺组织miR-21表达明显下调(2-△△Ct:0.021±0.005比0.037±0.006),caspase-3蛋白表达明显上调(A值:0.423±0.081比0.123±0.023,均P＜ 0.05).给予miR-21抑制剂预处理后,miR-21表达进一步下调(2-△△Ct:0.014±0.003比0.021 ±0.005),caspase-3蛋白表达进一步上调(A值:0.691±0.085比0.423±0.081,均P＜ 0.05);空病毒对照组miR-21(2-△△Ct:0.025±0.007比0.021±0.005)和caspase-3表达(A值:0.475±0.062比0.423±0.081)与高氧损伤组差异无统计学意义(均P＞0.05).③与空气对照组比较,高氧损伤组凋亡细胞增多.给予miR-21抑制剂预处理后,凋亡细胞较高氧损伤组进一步增多;而空病毒对照组则无明显变化.结论 抑制体内miR-21表达可以加重HALI大鼠肺组织损伤,增加AECⅡ凋亡.

关键词：微小RNA-21、急性肺损伤、高氧性、肺泡上皮细胞、Ⅱ型、凋亡

所属期刊栏目：29

分类号：R-3;R45

资助基金：National Natural Science Foundation of China 81560019国家自然科学基金81560019

在线出版日期：2017-05-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：244-248