咪唑克生对内毒素攻击小鼠体内及体外活化巨噬细胞炎性介质释放的抗炎效应

摘要：

目的 观察咪唑克生(IDA)对内毒素脂多糖(LPS)攻击小鼠体内以及体外活化巨噬细胞的抗炎效应,探讨其可能的分子机制.方法 体内实验:将30只成年雄性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为对照组、模型组及IDA低、中、高剂量组(IDA-L、IDA-M、IDA-H组),每组6只.采用腹腔注射LPS 10 mg/kg制备炎症模型,对照组注射等量生理盐水;IDA各组制模同时相应注射IDA 0.3、1.0、3.0 mg/kg进行干预.于制模后6h取血备检.体外实验:收集20只成年雄性C57BL/6小鼠原代腹腔巨噬细胞,分为空白组、LPS组(10 mg/L)及LPS+IDA-L、IDA-M、IDA-H组(10 mg/L LPS+5、25、100 μmol/L IDA),于24 h收集培养上清备检.检测方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、单核细胞趋化因子-1 (MCP-1)及一氧化氮(NO)含量;采用蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)测定IDA对巨噬细胞核转录因子-κB(NF-κB)表达的影响.结果 ①体内实验:模型组血清TNF-α(ng/L:403.96±40.98比17.50±8.68)、IL-6(ng/L:61 400.31±7 826.61比2436.30±448.89)均较对照组显著升高(均P＜0.01);IDA能剂量依赖性地抑制炎性因子的升高,以IDA-H组尤甚[TNF-α (ng/L):170.09±28.53比403.96±40.98,IL-6(ng/L):16570.81±1083.65比61400.31±7826.61,均P＜0.01].②体外实验:与空白组比较,LPS组巨噬细胞分泌炎性因子量明显增加[TNF-α(ng/L):7259.14±320.70比28.50±27.08,IL-6(ng/L):14809.60±5852.73比1113.47±465.53,MCP-1 (ng/L):20847.37±1788.33比447.37±395.69,NO (tmol/L):1 900.00±144.31比603.03±102.18,均P＜0.01];IDA能剂量依赖性地抑制上述因子的分泌,以LPS+IDA-H组作用尤甚[TNF-α(ng/L):784.40±281.90比7259.14±320.70,IL-6 (ng/L):1 802.96±1534.18比14809.60±5852.73,MCP-1 (ng/L):2005.26±1534.28比20847.37±1 788.33,NO (μmol/L):654.54±150.21比1 900.00±144.31,均P＜0.05].100 μmol/L IDA可使巨噬细胞NF-κBp65入核提前至15 min且表达明显增加(灰度值:18.70±2.29比1.09±0.36,P＜0.05),但可减少NF-κBp50核内表达,45 min时差异显著(灰度值:1.99±0 14比2.94±0.54,P＜0.05).结论 IDA能明显减轻LPS攻击小鼠的炎症反应并抑制巨噬细胞分泌炎性因子,且呈剂量依赖性,以100 μmol/L高浓度的抗炎效应最明显,其抗炎作用可能与NF-κB信号途径有关.

关键词：咪唑克生、内毒素、巨噬细胞、抗炎作用、分子机制

所属期刊栏目：28

分类号：R576;R734.2;R631

在线出版日期：2016-07-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：445-449