α7亚基烟碱乙酰胆碱受体在右美托咪定 防治内毒素血症小鼠谵妄中的作用

摘要：

目的：观察α7亚基烟碱乙酰胆碱受体（α7nAChR）在右美托咪定（DEX）防治内毒素血症谵妄发生中的作用，并探讨其作用机制。方法将100只雄性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为生理盐水对照组（NS组）、DEX对照组、脂多糖（LPS）诱导内毒素血症模型组（LPS组）、DEX保护组（DEX+LPS组）、α-银环蛇毒素拮抗组（α-BGT+DEX+LPS组），每组20只。采用腹腔注射LPS20mg/kg制备内毒素血症模型，NS组和DEX对照组给予等量生理盐水。DEX对照组、DEX+LPS组和α-BGT+DEX+LPS组小鼠于制模前15min腹腔注射DEX40μg/kg，α-BGT+DEX+LPS组于注射DEX前15min腹腔注射α7nAChR抑制剂α-BGT1μg/kg；NS组给予等量生理盐水。制模前及制模后24h每组取10只小鼠进行旷场实验，实验结束后处死小鼠留取标本，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和神经元特异性烯醇化酶（NSE）水平，蛋白质免疫印迹试验（WesternBlot）检测海马组织胆碱乙酰转移酶（ChAT）及乙酰胆碱酯酶（AChE）表达量。另取10只小鼠行新物体识别实验，观察训练阶段探究总时间及制模后3h和24h的偏好指数。结果 NS组和DEX对照组各项指标比较差异均无统计学意义。①旷场实验结果显示，制模前各组旷场实验观察指标均无差异。制模后24h，与NS组比较，LPS组小鼠表现为对新环境的认知、学习和记忆能力均下降，紧张度增加；DEX可明显改善小鼠的上述变化；而α-BGT可部分拮抗DEX对谵妄小鼠的保护作用。②新物体识别实验结果显示，与NS组比较，LPS组小鼠探究新事物的能力下降；DEX可改善小鼠的探究能力；而α-BGT可拮抗DEX的保护作用。③ELISA结果显示，LPS组血清TNF-α和NSE水平较NS组明显升高，DEX可抑制LPS诱导的血清TNF-α和NSE水平升高，而α-BGT可拮抗DEX的保护作用〔NS组、LPS组、DEX+LPS组、α-BGT+DEX+LPS组TNF-α（ng/L）分别为23.72±3.13、808.78±87.86、192.96±31.47、829.99±80.98，NSE （μg/L）分别为8.70±0.74、25.90±3.03、18.10±2.14、23.12±2.21，均P＜0.01〕。④WesternBlot结果显示，与NS组比较，LPS组海马组织ChAT表达明显下降，AChE表达明显升高，DEX可逆转ChAT和AChE的表达变化，而α-BGT可拮抗DEX的保护作用〔NS组、LPS组、DEX+LPS组、α-BGT+DEX+LPS组ChAT（灰度值）分别为1.536±0.150、0.381±0.138、0.914±0.173、0.628±0.088，AChE（灰度值）分别为0.382±0.201、1.843±0.325、0.898±0.155、1.470±0.220，P＜0.05或P＜0.01〕。结论内毒素血症小鼠可发生谵妄等认知功能障碍；DEX可通过调节脑内神经递质AChE和ChAT的表达量而改善谵妄症状，从而起到脑保护作用，其机制可能与α7nAChR有关。

关键词：内毒素血症、谵妄、右美托咪定、乙酰胆碱、α7亚基烟碱乙酰胆碱受体

分类号：R39;TQ4

资助基金：国家自然科学基金30972852@@@@ National Natural Science Foundation of China 30972852

在线出版日期：2016-04-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：127-133