白藜芦醇对百草枯中毒小鼠 肺损伤的干预及机制

摘要：

目的：观察用白藜芦醇（Res）干预对百草枯（PQ）中毒小鼠死亡率和肺损伤的影响，探讨核转录因子-κB（NF-κB）炎症通路在其中的作用机制。方法68只SPF级健康雄性ICR小鼠，20只用于观察死亡情况（每组10只），48只用于指标检测（每组6只）。按随机数字表法将小鼠分为生理盐水（NS）对照组、Res对照组、PQ组和PQ+Res组，后两组再分为6、24、72h亚组。一次腹腔注射30mg/kgPQ建立PQ中毒小鼠模型；于小鼠染毒后立即于对侧腹腔注射Res60mg/kg进行干预。分别于染毒后6、24、72h取血后活杀小鼠留取肺组织，用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素（IL-6、IL-1β）含量；电镜下观察肺组织结构变化；原位末端缺刻标记试验（TUNEL）检测细胞凋亡，并计算细胞凋亡率；蛋白质免疫印迹试验（WesternBlot）检测胞核内NF-κBp65蛋白表达。结果与PQ组相比，PQ+Res组小鼠48、72、96h累计死亡数有所下降（分别为0比2、2比5、4比6），但差异无统计学意义（均P＞0.05）。电镜下观察可见，PQ组肺组织损伤较NS对照组明显加重，Res干预能够减轻小鼠肺组织损伤程度。与NS对照组〔（2.45±0.61）%〕相比，PQ组6h肺组织细胞凋亡率即明显增加〔（8.42±1.48）%〕，72h达峰值〔（21.23±3.47）%〕；Res干预能够有效减低PQ中毒后小鼠肺组织细胞的凋亡率〔6h：（5.56±1.31）%比（8.42±1.48）%，24h：（11.14±2.07）%比（16.88±2.96）%，72h：（13.28±2.32）%比（21.23±3.47）%，均P＜0.05〕。PQ中毒后血清TNF-α、IL-6和IL-1β水平以及肺组织细胞核NF-κBp65表达均明显增加；Res干预后上述各指标均较PQ组明显降低〔TNF-α（ng/L）：6h 为2.62±0.29比4.06±0.74，24h 为3.98±0.41比6.79±0.80，72h 为5.06±0.75比11.00±0.75；IL-6（ng/L）：6h 为14.19±1.54比16.55±1.24，24h 为13.21±1.37比19.73±0.85，72h 为13.72±0.56比22.45±0.72；IL-1β（ng/L）：6h为8.54±1.64比12.59±0.66，24h为10.15±0.29比16.24±1.03，72h为16.14±0.70比19.55±0.56；6hNF-κBp65（以NS对照组为1）：（1.34±0.07）倍比（1.86±0.11）倍；均P＜0.05〕。结论 Res干预不能避免PQ中毒小鼠的死亡，但能够减轻肺组织损伤程度和细胞凋亡。Res对PQ中毒肺损伤的保护机制与其对NF-κBp65炎症反应通路的抑制效应有关。

关键词：中毒、百草枯、白藜芦醇、急性肺损伤、核转录因子-κB、炎症通路

分类号：R74;R73

资助基金：浙江省自然科学基金重点项目LZ12H26001；浙江省医药卫生平台研究计划重点项目2012ZDA034；浙江省医学创新学科建设计划11-CX26；浙江省中医药重点学科计划2012-XK-A28； 浙江省“十二五”重点学科建设项目2012-207Fund program:Key Program of Natural Science Foundation of Zhejiang Province of ChinaLZ12H26001;Key Program of Medical and Health Research Program of Zhejiang Province2012ZDA034;Key Construction Academic Subject Medical Innovation of Zhejiang Province11-CX26;Key Construction Academic Subject Traditional Chinese Medicine of Zhejiang Province2012-XK-A28;Key Discipline Construction Project of Zhejiang Provincial 12th Five-Year Program2012-207

在线出版日期：2016-03-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：33-37