内皮祖细胞移植对脓毒症大鼠的治疗作用

摘要：

目的：探讨内皮祖细胞（EPCs）移植在细菌内毒素脂多糖（LPS）所致脓毒症中的治疗作用。方法选择同遗传背景的清洁级雄性SD大鼠60只，按随机数字表法将大鼠分为对照组、模型组和EPCs移植组3组，每组20只。尾静脉注射LPS 5 mg/kg诱导脓毒症模型，对照组注射等量生理盐水。分离、培养、鉴定大鼠EPCs，用绿色荧光蛋白腺病毒转染标记EPCs。EPCs移植组于LPS注射后1 h经尾静脉注入荧光标记的EPCs悬液，活体成像仪及冰冻切片检测组织中荧光标记的EPCs表达。移植后7 d解剖大鼠经腹主动脉采血，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测外周血白细胞介素（IL-6、IL-10）水平；取肺、肝及肾组织，检测各组织湿/干质量（W/D）比值，苏木素-伊红（HE）染色观察各组织病理学改变，实时反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测各组织Toll样受体4（TLR4）mRNA表达。结果流式细胞仪检测培养第5代时EPCs细胞CD133、CD34的双标记阳性率为99.0%；将标记绿色荧光蛋白的EPCs移植给大鼠后，荧光显示EPCs主要集中在大鼠的胸腹部，血管附近荧光较强。EPCs移植可显著减轻脓毒症大鼠肺、肝及肾组织炎细胞浸润、细胞损伤。与对照组比较，模型组外周血IL-6、IL-10水平明显升高，各器官组织W/D比值及TLR4 mRNA表达也明显升高。EPCs移植可显著降低模型大鼠外周血IL-6、IL-10水平〔IL-6（μg/L）：2.127±0.118比2.664±0.438，IL-10（ng/L）：24.5±3.9比31.5±3.8，均P＜0.01〕，降低肺、肝及肾组织W/D比值（肺组织：4.68±0.24比5.48±0.15，肝组织：3.33±0.11比3.94±0.09，肾组织：4.08±0.20比4.84±0.21，均P＜0.01），下调肺、肝及肾组织TLR4 mRNA表达（×103，肺组织：782±131比1136±126，肝组织：39.1±14.0比69.2±8.7，肾组织：52.2±15.2比83.5±17.1，均P＜0.01）。结论 EPCs静脉移植后能成功到达脓毒症大鼠的肺、肝及肾组织，下调促炎因子，使机体恢复促炎/抗炎平衡，显著缓解肺、肝及肾组织损伤。

关键词：内皮祖细胞、干细胞移植、脓毒症、炎症反应、Toll样受体4、大鼠

分类号：R73;R65

资助基金：内蒙古自治区自然科学基金2012MS1163

在线出版日期：2015-07-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：514-519