降钙素基因相关肽对高氧暴露下肺泡Ⅱ型上皮细胞增殖及蛋白激酶Cα信号途径的调控作用

摘要：

目的 探讨降钙素基因相关肽(CGRP)对高氧暴露下肺泡Ⅱ型上皮细胞(AEC Ⅱ)的促增殖作用及其蛋白激酶Cα/核转录因子-κgB(PKCa/NF-κB)信号途径的调控机制.方法 将原代分离培养的孕21 d胎鼠AEC Ⅱ分为空气组、高氧组、高氧CGRP组、高氧CGRP拮抗剂组.空气组和高氧组分别在21%O2或85%O2中暴露24 h;高氧CGRP组在高氧处理前加入CGRP,高氧CGRP拮抗剂组同时加入CGRP和CGRP受体拮抗剂CGRP8-37.采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法和流式细胞术测定细胞增殖能力和不同细胞周期细胞比例;蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测胞膜和胞质PKCα的表达;激光共聚焦检测NF-κB p65的细胞核表达.结果 高氧组G0/G1期细胞比例明显高于空气组[(80.652±6.253)%比(45.825±2.899)%],而细胞增殖率[(68.752±5.766)%比(100.000±6.682)%]及S期、G2/M期细胞比例[分别为(14.198±4.785)%比(27.470±2.775)%,(5.148±1.688)%比(26.708±1.863)%]均低于空气组(均P<0.01).CGRP干预可提高高氧暴露AEC Ⅱ的增殖能力[(94.813±6.102)%],使S期和G2/M期细胞增多((30.547±9.861)%,(17.668±9.509)%,均P<0.01].高氧组胞膜与胞质PKCα比值显著低于空气组(0.63±0.10比1.00±0.09),而NF-κB p65的荧光强度高于空气组(22.98±2.20比14.54±2.35);高氧CGRP组胞膜与胞质PKCα比值(1.41±0.23)及核内NF-κB p65荧光强度(35.38±3.37)均高于高氧组(0.63±0.10,22.98±2.20)及高氧CGRP拮抗剂组(O.74±0.10,24.88±1.81,均P<0.01).结论 CGRP可促进高氧暴露下AEC Ⅱ的生长增殖;PKCα参与了CGRP对细胞作用的信号传递,而NF-κB是PKCα的下游分子之一,仅部分执行PKCα的效应.

关键词：肺泡Ⅱ型上皮细胞、蛋白激酶C、核转录因子-κB、降钙素基因相关肽、高氧

所属期刊栏目：22

分类号：R3(基础医学)

资助基金：国家自然科学基金面上项目30670931;云南省应用基础研究项目2008ZC083M

在线出版日期：2010-06-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

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