严重烫伤合并铜绿假单胞菌脓毒症家兔外周血淋巴细胞蛋白质组学的研究

摘要：

目的 研究烫伤脓毒症时外周血淋巴细胞蛋白质组的变化特点.方法 24只雄性成年家兔被随机分为对照组、烫伤组、烫伤脓毒症2 h和6 h组,每组6只.采用30%总体表面积(TBSA)Ⅲ度烫伤模型,烫伤后24 h经耳缘静脉注射铜绿假单胞菌悬液(ATCC 27853,浓度6×1012 cfu/L)1 ml/kg制备烫伤脓毒症模型;对照组用37 ℃温水进行假烫伤.烫伤组于伤后24 h、烫伤脓毒症组于注射菌液后2 h和6 h取颈动脉血分离淋巴细胞,裂解细胞,提取总蛋白,用双向凝胶电泳分离蛋白质,考马斯亮蓝染色,扫描、分析图像并筛选差异蛋白质点(判断差异的标准为平均表达量相差超过3倍,由本课题组设定).应用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱分析方法得到肽质量指纹图谱,利用Mascot软件搜索数据库鉴定蛋白质.结果 对照组、烫伤组、烫伤脓毒症2 h和6 h组平均蛋白质点数分别为1 051±21、1 026±30、1 078±36、1 065±31,平均匹配率分别为91%、89%、92%、94%.烫伤脓毒症2 h与6 h组间各蛋白质点表达量无差异;与对照组比较,烫伤组、烫伤脓毒症2 h和6 h组共筛选出19个差异蛋白质点,得到鉴定的有12个,包括11种蛋白质,即Cofilin、肽酰-脯氨酰-顺反式异构酶胞溶质蛋白A、泛素、核苷二磷酸激酶、谷氨酸脱氢酶、硒结合蛋白Ⅰ、β-肌动蛋白、过氧化物氧化还原素6、膜联蛋白Ⅰ、肌动蛋白-3、细胞视黄酸结合蛋白.结论 严重烫伤并脓毒症时外周血淋巴细胞蛋白质组发生变化,表达改变并经鉴定的11种蛋白质功能涉及蛋白质折叠、装配、运输、降解,以及胞内信号传递、炎症、免疫、能量代谢、细胞增殖、分化、凋亡等,这些蛋白质与烧伤后脓毒症的发生有关.

关键词：兔、烧伤、脓毒症、铜绿假单胞菌、淋巴细胞、蛋白质组

所属期刊栏目：21

分类号：R6(外科学)

资助基金：国家自然科学基金30571920

在线出版日期：2009-10-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：455-459,前插一