以cDNA为内参标RT-PCR定量检测心肌细胞内p53和Bcl-2基因mRNA表达量的方法研究

摘要：

目的:探讨p53和Bcl2基因在急性心肌梗死时心肌细胞中mRNA表达量的检测方法.方法:用以cDNA为内参标的逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测p53和Bcl-2基因的mRNA表达量.结果:p53基因mRNA表达量[mRNA/总RNA(ng/g)]依次为:冠脉结扎后4小时组(57 648.78±19 776.96) ng/g>结扎后6小时组(339.06±104.11) ng/g>结扎后3小时组(165.44±33.36) ng/g>结扎后2小时组(88.25±16.65) ng/g>未结扎(0)组(3.16±0.69) ng/g和结扎后1小时组(16.37±2.73) ng/g、8小时组(23.13±7.03) ng/g、12小时组(6.75±2.86) ng/g,P均<0.05;Bcl2基因mRNA表达量[mRNA/g总RNA(ng/g)]:冠脉结扎后3小时组(4.53±1.59) ng/g、4小时组(0.02±0.01) ng/g和6小时组(3.46±0.39) ng/g<结扎后2小时组(52.48±14.18) ng/g、8小时组(59.24±2.91) ng/g<结扎后1小时组(77.20±12.48) ng/g和未结扎(0小时)组(81.77±9.62) ng/g<结扎后12小时组(99.60±4.71) ng/g,P均<0.05.该种方法能对不同的样本检出不同量的mRNA含量,其特异性强,且能检出0.02 ng/g的mRNA含量,敏感性高.结论:以cDNA为内参标的RT-PCR定量检测心肌细胞内p53和Bcl-2基因mRNA表达量的方法,其特异性强、敏感性高;在普通的分子生物学实验室完成,方法简便,且价钱便宜,可推广使用.

关键词：心肌、p53、Bcl-2、逆转录-聚合酶链反应、cDNA

所属期刊栏目：14

分类号：Q786;R542.2(基因工程（遗传工程）)

资助基金：卫生部科研项目1996-1-116

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：597-601