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树鼩海马微灌流谷氨酸和钙所致线粒体应激及银杏内酯B的影响

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目的 观察树鼩海马微环境中谷氨酸(Glu)及钙(Ca2+)改变对细胞色素C(Cyt C)释放以及caspase凋亡基因激活的影响,探讨银杏内酯B(GB)干预海马神经元线粒体应激的分子机制.方法 使用单泵等速微灌流系统行树鼩海马GIu及Ca2+微灌流,24 h后用免疫组化法观察海马神经元Cyt C蛋白表达;免疫印迹法检测线粒体及胞质的Cyt C含量;实时荧光定量PCR技术检测海马caspase-3及caspase-9 mRNA的含量.微灌流Glu和Ca2+溶液后6 h于舌下静脉注射银杏内酯B 5 mg/kg ,24 h后观察上述指标的改变.结果 树鼩海马微灌流Glu和Ca2+溶液后24 h,线粒体Cyt C含量显著下降,而胞质部分出现Cyt C;海马组织caspase-3、caspasp-9mRNA明显升高.GB治疗组线粒体Cyt C含量增多,胞质中仍有Cyt C存在,而海马组织caspase-9 mRNA显著降低,但caspase-3 mRNA无差异.结论 海马微环境中Glu与Ca2+的大量堆积促进线粒体Cyt C的释放,可能是激活caspase级联反应而导致线粒体应激、神经元继发损伤的始动环节;GB的神经保护效应可能与其特异性拮抗血小板活化因子(PAF)受体,抑制Ca2+内流,部分阻滞Cyt C释放入胞质,从而减少caspase-9基因转录有关.

海马、线粒体、细胞色素C、银杏内酯

11

R365(病理学)

国家自然科学基金3066056;高等学校博士学科点专项科研项目20050678008;云南省自然科学基金2004C0043M

2007-07-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共6页

158-162,插1

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中国微循环

1007-8568

32-1473/R

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2007,11(3)

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