环介导等温扩增技术用于检测幽门螺旋杆菌CagA基因
目的 建立环介导等温扩增技术(LAMP)用于检测唾液和胃液中幽门螺旋杆菌CagA基因.方法 收集临床阳性样本并用荧光定量PCR检测,然后根据幽门螺旋杆菌的CagA基因序列设计LAMP引物并优化反应条件.通过LAMP检测来验证引物的特异性,并通过检测稀释的模板来验证引物的灵敏性.同时加入钙黄绿素使产物显色,使CagA基因检测可视化.最后,用LAMP方法检测收集的临床样本,并计算阳性率,应用配对卡方检验比较LAMP和荧光定量PCR的统计学差异.结果 LAMP体系的特异性和灵敏性均较好,对CagA基因检测的灵敏性是102 IU/mL.另外,利用钙黄绿素进行产物检测的效果和电泳结果相当.通过对临床样本的检测,CagA阳性样本的LAMP检测结果和荧光定量PCR差异有统计学意义(P<0.05).结论 LAMP对CagA基因的检测具有较好的特异性和灵敏性,操作简便,在基层医院有较好的应用前景.
幽门螺旋杆菌、环介导等温扩增技术、CagA
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R446.19(诊断学)
重点科技研究计划20180914
2019-07-04(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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