基于微滴式数字PCR的急性早幼粒细胞白血病治疗监测相关lnc-LOC100506453检测方法的建立
目的 建立急性早幼粒细胞白血病(APL)患者治疗监测相关lnc-LOC100506453的微滴式数字PCR(ddPCR)定量检测方法,完成方法学评价,并用于APL患者的外周血检测.方法 设计和合成lnc-LOC100506453 ddPCR的引物和探针,优化ddPCR的反应体系和条件.评价所建立ddPCR的方法学性能,包括重复性、特异性、检测下限与定量检测范围.最后用于APL患者的外周血标本的检测.结果 lnc-LOC100506453 ddPCR方法的最佳退火温度为59℃,最佳引物浓度为900 nmol/L.该ddPCR方法的特异性为100%,批间和批内重复性的CV值均<10%.ddPCR方法的检测下限达到0.5 copies/μl,定量检测值为0.5 copies/μl~5 000 copies/μl.在对临床标本的ddPCR检测中,APL患者外周血lnc-LOC100506453表达量明显高于非APL患者和健康对照者(P<0.001).APL患者诱导分化后的外周血lnc-LOC100506453表达量低于APL治疗前(P<0.001),APL患者完全缓解后的表达量进一步下降(P<0.001).结论 本研究所建立的lnc-LOC100506453 ddPCR方法具有较好的方法学检测性能,可用于APL初诊患者的诊断以及APL随访患者的微创治疗监测.
微滴式数字PCR、长链非编码RNA、急性早幼粒细胞白血病、治疗监测
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R733.71(肿瘤学)
浙江省自然科学基金;浙江省卫生健康科技计划项目;温州市基础性科研计划;贺林院士新医学临床转化工作站科研基金项目
2022-10-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共5页
1796-1800