乙型肝炎病毒HBX蛋白与醛缩酶B相互作用的验证
目的 验证乙型肝炎病毒HBx蛋白与醛缩酶B(ALDOB)存在蛋白相互作用.方法 在CytoTrap细胞质酵母双杂交验证HBx蛋白与ALDOB蛋白发生相互作用的前提下,将HBx编码基因和ALDOB编码基因分别克隆入pFLAG-CMV-2载体和pcDNA3.1/myc-His(-)A载体.转染Huh7肝细胞,经蛋白质印迹法检测融合蛋白表达后,利用免疫共沉淀(CO-IP)进一步验证HBx蛋白与ALDOB蛋白在肝细胞内发生相互作用.结果 CytoTrap细胞质酵母双杂交验证HBx蛋白与ALDOB蛋白可以发生相互作用,并成功构建pFLAG-CMV-2-HBx和pcDNA3.1/myc-His(-)A-ALDOB载体,融合蛋白FLAG-HBx和ALDOB-myc可以在Huh7细胞内表达并能相互沉淀.结论 HBx蛋白和ALDOB蛋白存在直接相互作用.
HBx蛋白、醛缩酶B、免疫共沉淀
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R346(人体生物化学、分子生物学)
济宁市科技发展计划2014JNNK-25
2019-03-13(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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