基于芯片式数字PCR技术的乙型肝炎病毒绝对定量检测方法的建立及应用

摘要：

目的 建立芯片式数字PCR技术用于乙型肝炎病毒的绝对定量检测,并对此方法的灵敏度、检出限、检测范围开展评估.方法 本研究设计了芯片式数字PCR用于乙型肝炎病毒绝对定量检测的引物探针,并对扩增条件、反应的体系进行了优化,采用阴性对照法和稀释法对检出限、检测范围和检测方法的重复性进行评估.同时与实时荧光定量PCR的结果作了平行比较.结果 芯片式数字PCR检出限为3.94×104 copies/ml,检测范围是3.94×104 copies/ml～2.82 ×107copies/ml,重复性的相对标准偏差(RSD)为2.89％～13.37％.相比较实时荧光定量PCR,对样本的浓度要求苛刻,高稀释倍数与阴性对照均出现阳性.结论 本研究建立了芯片式数字PCR技术用于乙型肝炎病毒的绝对定量方法,不必依赖对照品或标准品,可高度耐受PCR反应抑制剂,为乙型肝炎病毒载量的测定提供了一种新的检测手段.

关键词：数字PCR、乙型肝炎病毒、绝对定量

所属期刊栏目：28

分类号：R512.62(传染病)

资助基金：浙江省医药卫生科技计划项目2014KYB318;丽水市2014年市级公益性技术应用研究自筹项目2014ZC-023;丽水市医学重点学科扶持项目2016zdxk02

在线出版日期：2018-06-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：925-928,933