2种食源性微生物胶体金银染技术的检测方法研究

摘要：

目的 建立一种可视化快速检测食源性微生物的新方法.方法 设计与沙门菌Inva基因,大肠杆菌uidA基因5”端和3”端互补的巯基化探针和氨基化探针以及靶探针.氨基化探针连接醛基化玻片,并与提取的靶DNA或靶探针互补连接,靶DNA或靶探针另一端再与巯基化探针连接形成复合结构;利用胶体金生物亲和性好的特点,让胶体金和巯基化探针连接,银染放大信号,检测微生物.结果 靶探针和靶DNA与两种探针杂交时分别选择1 mmol/L、100 nmol/L、1 nmol/L、100 pmol/L、1 pmol/L 5种浓度,并用不同靶DNA作对照;探针最低浓度为1 pmol/L,细菌靶DNA最低浓度为1 pmol/L,银染结果肉眼清晰可见.进一步验证实验结果,扩增Inva基因和uidA基因,分别得到400 kb和300 kbPCR产物,并与探针杂交银染,也得到了肉眼可见的清晰结果.结论 该方法可以快速、简便的检测食源性微生物,市场前景广阔.

关键词：胶体金、银染、食源性微生物

所属期刊栏目：28

分类号：R446.5(诊断学)

资助基金：甘肃省科学院青年科技创新基金2015QN-05;甘肃省自然基金项目1506RJZA191;甘肃省科学院应用开发项目2016JK-07;甘肃省科学院应用开发项目2016JK-05;甘肃省科学院院地合作项目2014-CG-25

在线出版日期：2018-05-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：385-389