柯萨奇病毒A10荧光定量PCR检测方法的建立

摘要：

目的 建立一种检测柯萨奇病毒A10的荧光定量PCR方法.方法 从GenBank上下载柯萨奇病毒A10 VP1基因序列并进行同源性分析,选取相对保守的区域设计引物和探针,建立和优化柯萨奇病毒A10荧光定量PCR检测反应体系,并对质粒标准品和临床样本进行检测,评估其特异性和灵敏度.结果 优化的引物探针浓度分别为0.5μmol/L和0.2 μmol/L,退火/延伸温度为58℃.建立的柯萨奇病毒A10荧光定量PCR检测方法具有良好的特异性,仅质粒标准品和柯萨奇病毒A10阳性临床样本能获得S形扩增曲线,其他临床样本未见任何扩增,而且灵敏度高.probit回归分析估测其检测下限为3.82拷贝/μl(95％置信区间).结论 建立的荧光定量PCR方法能准确检测出柯萨奇病毒A10,可用于临床样本柯萨奇病毒A10的检测.

关键词：荧光定量PCR、手足口病、柯萨奇病毒A10

所属期刊栏目：28

分类号：R446.5(诊断学)

在线出版日期：2018-04-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：50-52