慢病毒介导长链非编码RNA LOC100132354过表达载体的构建及鉴定

摘要：

目的 探讨慢病毒介导LOC100132354过表达载体的构建及鉴定.方法 化学合成LOC100132354全基因序列,与GV303载体进行连接反应获得重组质粒;进一步制备感受态细胞,并行转化实验,PCR鉴定进行转化子,对阳性转化子进行测序;构建好的LOC100132354过表达载体转染至293T细胞包装病毒,采用荧光显微镜观察荧光情况,用qPCR检测LOC100132354的表达情况.结果 酶切结果与预期一致,阳性转化子克隆测序结果与LOC100132354的RNA序列完全一致,293T细胞转染后荧光表达结果较强,qPCR结果显示293T细胞转染过表达载体后LOC100132354表达水平为对照组的555427.148倍,差异有统计学意义(P＜0.001).结论 成功构建了慢病毒介导LOC100132354过表达载体,为后续进一步研究提供了基础.

关键词：慢病毒、过表达载体、长链非编码RNA、LOC100132354

所属期刊栏目：27

分类号：R734.2(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金;浙江省自然基金项目;温州市科技局项目

在线出版日期：2017-11-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：2588-2592